作业帮实验室5L通气机械搅拌发酵罐的实罐灭菌流程
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/15 18:15:54
实验室5L通气机械搅拌发酵罐的实罐灭菌流程
实验室5L通气机械搅拌发酵罐的实罐灭菌流程
实验室5L通气机械搅拌发酵罐的实罐灭菌流程
你的发酵罐是用什么样的灭菌方法?蒸汽原位灭菌（有蒸汽发生器）?不是的话,直接把罐放到灭菌锅里去灭!
下面是蒸汽原位灭菌的流程：
灭菌要进行空消和实消两步.空消是在投料前,对气路、料路、种子罐、发酵罐用蒸汽进行灭菌,消除所有死角的杂菌,保证系统处于无菌状态.实消是当罐内加入培养基后,用蒸汽对培养基进行灭菌的过程,种子罐和发酵罐实消的操作过程相同.
空消过程中,维持蒸汽温度121℃左右,先开排污水阀和进气阀,排空夹套水,在对管路、滤器和种子罐发酵罐灭菌,空消时间大约为30到40分钟,当设备初次使用或者长期不用的情况下,最好采用间歇灭菌的方法,间歇灭菌指第一次空消结束后,间隔3到5个小时再空消一次,以便杀死芽孢.除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压,因此,蒸汽减压阀必须调整在0.13Mpa,不得超过0.15MPa.空消时,应将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开,使蒸汽通过这些阀门排出,同时保持罐压为0.13～0.15Mpa.空消结束后,应将罐内冷凝水排掉,并将排空阀门打开,防止冷却后罐内产生负压、损坏设备.空消时,溶氧、PH 电极取出,可以延长其使用寿命.
空消结束后,应尽快将配好的培养基从加料口加入罐内,此时夹套内应无冷却水.培养基在进罐之前,应先糊化,一般培养基的配方量以罐体全容积的70%左右计算(泡沫多的培养基为65% 左右,泡沫少的培养基可达75%～80%),考虑到冷凝水和接种量因素,加水量为罐体全容积的50% 左右,加水量的多少与培养基温度和蒸汽压力等因素有关,需在实践中摸索.先开启机械搅拌装置,使罐内物料均匀混合,转速50～100rpm.打开夹套蒸汽阀、排汽阀,对罐内培养基预热,当罐内温度升到90℃时,关闭夹套进汽阀,打开罐内所有进汽阀,通入蒸汽.当罐温上升到105℃时,缓缓打开排汽阀,将罐顶冷空气排掉,持续五分钟后,关闭排汽阀.当罐压升至0.12Mpa,温度升到121～123℃时,控制蒸汽阀门开度,保持罐压不变,30 分钟后停止供汽.打开冷却水的进排阀门,在夹套内通水冷却,当罐内压力降至0.05Mpa 时,微微开启排气阀和进气阀,进行通气搅拌,加速冷却速度,并保持罐压为0.05Mpa,直到罐温降至接种温度.