跑电泳后,如何根据Marker亮度估计目的条带的浓度?跑电泳后,如何根据Marker亮度来估计目的条带拷贝数?本人Marker一般点5ul.

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/14 14:34:18
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博凌科为-为你Marker不能用来估计拷贝数,因为你本身也不知道Marker每一个条带的拷贝数.事实上.你要用单纯比较亮度的方式来估计拷贝数是很难的,除非你用已知拷贝数,已知序列长度的.如果你非要这么做的话,用一个已知拷贝数,和总长度质粒,用单一内切酶,酶切线性化后,和你的样品一起跑,然后可以用软件比如Quantity One计算.

如果非常粗略的估计,还是可以做到的。
一般的MARKER条带浓度是50ng,加亮带是100ng。如果你的条带与其相当,可以估计出你的条带的量,并计算出浓度。
这样有浓度了,有条带大小了,就可以计算拷贝数了。
拷贝数计算公式:
(6.02 x 10的23次拷贝数/摩尔) x (浓度g/ml) / (MW g/mol) = copies/ml.
例:3000 碱...

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如果非常粗略的估计,还是可以做到的。
一般的MARKER条带浓度是50ng,加亮带是100ng。如果你的条带与其相当,可以估计出你的条带的量,并计算出浓度。
这样有浓度了,有条带大小了,就可以计算拷贝数了。
拷贝数计算公式:
(6.02 x 10的23次拷贝数/摩尔) x (浓度g/ml) / (MW g/mol) = copies/ml.
例:3000 碱基质粒, 浓度100 ng/ml , MW = 3000 bp x 660 dalton/bp = 1.98 x 10的6次 daltons,1 mol = 1.98 x 10的6次 g.

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跑电泳后,如何根据Marker亮度估计目的条带的浓度?跑电泳后,如何根据Marker亮度来估计目的条带拷贝数?本人Marker一般点5ul. western blotting marker 跑不开是什么原因?跑电泳时marker跑不开,都有什么样的原因? 请教buffer和marker在跑电泳时的作用,还有loading buffer和loading marker在跑电泳时的作用,谢谢了如题 PCR产物电泳鉴定时Marker条带竟然没有.我前两天跑电泳的时候,PCR产物倒是能看到条带,就是marker条带没有了,不晓得是怎么回事?以前跑电泳时,Marker条带都很清晰的. 做完PCR后为什么要跑电泳 做Western Blot 跑电泳之后的胶上Marker的条带,比较清晰,但与模板Marker的条带却对应不上,而且少一条带 根据DNA marker 在凝胶电泳中条带亮度,测定目的质粒的浓度,这个方法靠谱吗? RT-PCR电泳照片做RT-PCR跑电泳时,只在一个孔中单独加了内参,其他孔中分别加了marker和目的基因,这样的照片发表文章时行吗?看其他人的电泳照片内参的亮度都是一样的,我就只单独加了一个内 我做RT-PCR要用Marker和β-actin吗?我现在要做RT-PCR,从大鼠肝细胞中提RNA,听一个学长说提出总RNA后可以取一半跑下电泳,看看RNA的量,这一步需不需要Marker呢?还有之后做PCR跑电泳是不是还要订个β-ac PCR后DNA跑电泳条带不明显的原因 我用天根粪便基因组Dna提取试剂盒提取Dna然后直接跑电泳,marker可以看到,但样品什么都没有…请教高人 什么叫跑电泳 如何根据频数估计平均数的范围 PBI121双酶切后回收不到我用的双酶切位点是SacⅠ和XbaⅠ,切开后的带的亮度还行,中孔的电泳我把三块胶切下来放一个管里回收的,回收试剂盒也是新的,用60微升洗脱,但是回收后再跑电泳就没有 dna跑电泳后怎么认 就是那个条带代表多少bp thanks 用总RNA跑电泳,rRNA是什么样子的条带?三条带是如何排列的? 使用bandscan marker,如何根据marker计算目的蛋白的分子量?现在已经得到个条带的灰度占泳道的百分比了,但是marker不知道怎样处理和使用... 1%琼脂糖电泳后,为什么看不到我的目的条带?我的目的条带是177bp,从质粒中双酶切后跑电泳,几乎看不到我的目的条带,是不是因为目的条带比较小,跑的比较前面,本身就容易变得模糊,亮度减弱