作业帮分子生物学方面的问题-----关于lac启动子 ：）在大肠杆菌中进行原核表达时,常常使用诱导型的lac启动子来推动基因的表达,我的问题是,lac启动子在其它的革兰氏阴性菌中也有相同或者相近的
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/27 01:24:59
分子生物学方面的问题-----关于lac启动子 ：）在大肠杆菌中进行原核表达时,常常使用诱导型的lac启动子来推动基因的表达,我的问题是,lac启动子在其它的革兰氏阴性菌中也有相同或者相近的
分子生物学方面的问题-----关于lac启动子 ：）
在大肠杆菌中进行原核表达时,常常使用诱导型的lac启动子来推动基因的表达,我的问题是,lac启动子在其它的革兰氏阴性菌中也有相同或者相近的启动子活性吗?比如在假单胞菌中,如果在目的基因前面添加lac启动子,它是否也能推动基因的表达呢》?
如果可以的话,那么在这些细菌中,可能没有编码lac启动子阻遏物的基因,这时候,lac是不是就不会受到阻遏,而变成组成型的启动子了呢?
在那边发帖子等回复实在太急人，经常要等一周时间才有人回复。这边牛人也挺多的，试试看吧 ：）
分子生物学方面的问题-----关于lac启动子 ：）在大肠杆菌中进行原核表达时,常常使用诱导型的lac启动子来推动基因的表达,我的问题是,lac启动子在其它的革兰氏阴性菌中也有相同或者相近的
Lac启动子：它来自大肠杆菌的乳糖操纵子,是DNA分子上一段有方向的核苷酸序列,由阻遏蛋白基因(LacI)、启动基因(P)、操纵基因(O)和编码3个与乳糖利用有关的酶的基因结构所组成.Lac启动子受分解代谢系统的正调控和阻遏物的负调控.正调控通过CAP(catabolite gene activation protein)因子和cAMP来激活启动子,促使转录进行.负调控则是由调节基因产生LacZ阻遏蛋白,该阻遏蛋白能与操纵基因结合阻止转录.乳糖及某些类似物如IPTG可与阻遏蛋白形成复合物,使其构型改变,不能与O基因结合,从而解除这种阻遏,诱导转录发生.在讲些相关知识：
启动子是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并起始RNA合成的序列,它是基因表达不可缺少的重要调控序列.没有启动子,基因就不能转录.由于细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子,因此原核表达载体所用的启动子必须是原核启动子.
原核启动子是由两段彼此分开且又高度保守的核苷酸序列组成,对mRNA的合成极为重要.在转录起始点上游5～10 bp处,有一段由6～8个碱基组成,富含A和T的区域,称为Pribnow 盒,又名TATA 盒或－10区.来源不同的启动子,Pribnow 盒的碱基顺序稍有变化.在距转录起始位点上游35 bp处,有一段由10 bp组成的区域,称为-35区.转录时大肠杆菌RNA聚合酶识别并结合启动子.-35区与RNA聚合酶s亚基结合,-10区与RNA聚合酶的核心酶结合,在转录起始位点附近DNA被解旋形成单链,RNA聚合酶使第一和第二核苷酸形成磷酸二酯键,以后在RNA聚合酶作用下向前推进,形成新生的RNA链.
原核表达系统中通常使用的可调控的启动子有Lac(乳糖启动子)、Trp(色氨酸启动子)、Tac(乳糖和色氨酸的杂合启动子) 、lPL (l噬菌体的左向启动子)、T7噬菌体启动子等.
启动子是DNA链上一段能与RNA聚合酶结合并起始RNA合成的序列,它是基因表达不可缺少的重要调控序列.没有启动子,基因就不能转录.由于细菌RNA聚合酶不能识别真核基因的启动子,因此原核表达载体所用的启动子必须是原核启动子.
原核启动子是由两段彼此分开且又高度保守的核苷酸序列组成,对mRNA的合成极为重要.在转录起始点上游5～10 bp处,有一段由6～8个碱基组成,富含A和T的区域,称为Pribnow 盒,又名TATA 盒或－10区.来源不同的启动子,Pribnow 盒的碱基顺序稍有变化.在距转录起始位点上游35 bp处,有一段由10 bp组成的区域,称为-35区.转录时大肠杆菌RNA聚合酶识别并结合启动子.-35区与RNA聚合酶s亚基结合,-10区与RNA聚合酶的核心酶结合,在转录起始位点附近DNA被解旋形成单链,RNA聚合酶使第一和第二核苷酸形成磷酸二酯键,以后在RNA聚合酶作用下向前推进,形成新生的RNA链.
原核表达系统中通常使用的可调控的启动子有Lac(乳糖启动子)、Trp(色氨酸启动子)、Tac(乳糖和色氨酸的杂合启动子) 、lPL (l噬菌体的左向启动子)、T7噬菌体启动子等.
SD序列
1974年Shine和Dalgarno首先发现,在mRNA上有核糖体的结合位点,它们是起始密码子AUG和一段位于AUG上游3～10 bp处的由3～9 bp组成的序列.这段序列富含嘌呤核苷酸,刚好与16S rRNA 3¢末端的富含嘧啶的序列互补,是核糖体RNA的识别与结合位点.以后将此序列命名为Shine-Dalgarno序列,简称SD序列.它与起始密码子AUG之间的距离是影响mRNA转录、翻译成蛋白的重要因素之一,某些蛋白质与SD序列结合也会影响mRNA与核糖体的结合,从而影响蛋白质的翻译.另外,真核基因的第二个密码子必须紧接在ATG之后,才能产生一个完整的蛋白质.
终止子
在一个基因的3¢末端或是一个操纵子的3¢末端往往有特定的核苷酸序列,且具有终止转录功能,这一序列称之为转录终止子,简称终止子(terminator).转录终止过程包括：RNA聚合酶停在DNA模板上不再前进,RNA的延伸也停止在终止信号上,完成转录的RNA从RNA聚合酶上释放出来.对RNA聚合酶起强终止作用的终止子在结构上有一些共同的特点,即有一段富含A/T的区域和一段富含G/C的区域,G/C富含区域又具有回文对称结构.这段终止子转录后形成的RNA具有茎环结构,并且有与A/T富含区对应的一串U.转录终止的机制较为复杂,并且结论尚不统一.但在构建表达载体时,为了稳定载体系统,防止克隆的外源基因表达干扰载体的稳定性,一般都在多克隆位点的下游插入一段很强的rrB核糖体RNA的转录终止子.
我想应该就像你说的那样的。
具体我也没做过，您再听一听其他人的观点。
你还是没太明白lac operon的结构，你是不是看到的老版本的书，建议你去gene8上查一查具体内容。
还有，启动子是promotor, 原版书上是lac operon。
不大可能吧，它调控编码的repressor是不是也能和其他细菌的位点结合？那么凑巧的构象吻合不大可能。
你可以再参考一下阿拉伯糖的调控。...
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你还是没太明白lac operon的结构，你是不是看到的老版本的书，建议你去gene8上查一查具体内容。
还有，启动子是promotor, 原版书上是lac operon。
不大可能吧，它调控编码的repressor是不是也能和其他细菌的位点结合？那么凑巧的构象吻合不大可能。
你可以再参考一下阿拉伯糖的调控。
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兄弟！你真专业。在这里恐怕很难有人回答吧？我是学生物技术的，建议你到丁香园或者生物通发帖子问问，那里有很多专家的。那里是不错的地方。
在这里三言两语很难讲清楚，建议你还是看看相关专业书，或是当面找老师问问。
这是楼主的马甲，上面各位说的这些基本知识我明白，其实我的问题很简单，来源于大肠杆菌乳糖操纵子的Lac启动子（含有-35。 -10和阻遏物结合区等必要结构）是一个很强的启动子，那么在其它的细菌中它是否也具有强的启动子活性，是否受阻遏？以假单胞菌为例吧，谢谢！...
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这是楼主的马甲，上面各位说的这些基本知识我明白，其实我的问题很简单，来源于大肠杆菌乳糖操纵子的Lac启动子（含有-35。 -10和阻遏物结合区等必要结构）是一个很强的启动子，那么在其它的细菌中它是否也具有强的启动子活性，是否受阻遏？以假单胞菌为例吧，谢谢！
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