做western处理蛋白时煮过头了会蛋白降解吗?做western,收下来的蛋白加好loading buffer后98度煮了一个小时...期间盖子盖紧了水分没有跑掉请问这样子的蛋白样品还能用吗?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/29 00:06:14
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做western处理蛋白时煮过头了会蛋白降解吗?做western,收下来的蛋白加好loading buffer后98度煮了一个小时...期间盖子盖紧了水分没有跑掉请问这样子的蛋白样品还能用吗?
做western处理蛋白时煮过头了会蛋白降解吗?
做western,收下来的蛋白加好loading buffer后98度煮了一个小时...期间盖子盖紧了水分没有跑掉
请问这样子的蛋白样品还能用吗?
做western处理蛋白时煮过头了会蛋白降解吗?做western,收下来的蛋白加好loading buffer后98度煮了一个小时...期间盖子盖紧了水分没有跑掉请问这样子的蛋白样品还能用吗?
煮沸时间不够使得蛋白质变性不充分或者形成二聚体会导致实验效果不好,煮过头的情况我也没有遇到过(貌似还没有碰到人煮个5-10分钟还会煮成一小时的- -|||),不过肯定的是变性已经充分.可以试一试,当然也有可能蛋白质长时间高温沸水作用下部分降解.
这就好比你把鸡蛋放到98度的水里放了一个小时,而且鸡蛋还加了LOADING BUFFER。
当然我个人没做过WESTERN,也不知道PROTOCOL是怎么写的,不过我想,这个蛋白你只能碰碰运气了。蛋白可能已经断了,不知道抗体还能不能找到蛋白。
GOOD LUCK。
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