RT-PCR 的原理

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/19 12:28:29
RT-PCR 的原理
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RT-PCR 的原理
RT-PCR 的原理

RT-PCR 的原理
由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成.随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常的PCR.原先的RNA模板被RNA酶 H降解,留下互补DNA.
　　RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术,可以检测很低拷贝数的RNA.RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断,并且可以用于定量监测某种RNA的含量.（检测基因表达的方法,参见Northern Blot法.
　　RT-PCR的关键步骤在是RNA的反转录,要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质.常用的反转录酶有两种,即鸟类成髓细胞性白细胞病毒（avian myeloblastosis virus,AMV）反转录酶和莫罗尼鼠类白血病病毒（moloney murine leukemia vrius,MMLV）反转录酶.RT-PCR有时候也会指代实时PCR(real-time PCR).为了与逆转录PCR相区别,通常被写作“定量PCR”(quantitative PCR)或者RTQ-PCR(real-time quantitative PCR).

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