可不可以有苯酚来代替tris饱和酚来提取DNA,如果不行可不可以有什么方法令苯酚可以用?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 18:31:01
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可不可以有苯酚来代替tris饱和酚来提取DNA,如果不行可不可以有什么方法令苯酚可以用?
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是这样的,苯酚在空气中极易被氧化,氧化后形成的醌类会和DNA链牢固结合,最严重的情况会导致提取的DNA无法进行后面的操作(PCR或者酶切).建议如果非用不可的话,就把苯酚进行重蒸一下,再用水或者tris盐酸饱和后再用.但是这个步骤太复杂,一般不建议去用,因为tris饱和酚实在是便宜的不行.如果是急用,我个人建议你干脆不要用苯酚,直接用氯仿/异戊醇.CTAB法一般用于植物基因组DNA的提取,不用酚抽提一般也没多大影响.
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如何配制水饱和酚提取DNA时为沉淀蛋白质,配酚、氯仿、异丙醇溶液,其中酚为水饱和的苯酚,把苯酚加入蒸馏水,起初呈无色,再加就变为白色混浊,水面有少量油滴,如何判断已经饱和?
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