实验室常用克隆载体和表达载体有哪些?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/06 10:00:23
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实验室常用克隆载体和表达载体有哪些?
实验室常用克隆载体和表达载体有哪些?
实验室常用克隆载体和表达载体有哪些?
一、根据载体的分子生物学特性划分
1. 质粒型载体—环状dsDNA分子,自主复制
2. 病毒型载体—环状、线状、ss-和ds-DNA分子,形成病毒颗粒
3.混合型载体—具质粒和病毒特性,特性的转换依赖于宿主细胞生物学特性
二、根据载体功能划分
1.普通型载体
1) 特点:至少有一个以上的克隆位点和两个标记基因,其中一 个用于转化体选择,另一个用于重组子检测.
2) 用途:基因组或cDNA文库的构建;次克隆(subcloning)或限制酶谱分析;外源DNA扩增.
例子:pBR322和pUC载体.
上述两例中的非重组子来源有两个:
a. 酶切反应时仍未被作用的pBR322或pUC18分子
b.酶切后的载体分子经自我连接又形成载体分子
克隆载体以TA载体为主。比如PMD-18T(大连宝生物代理的日本Takara公司的),表达载体可选用Roche的pGEM-T载体,有两个启动子:T7、SP6 。
现在表达载体用得最多的就是pET载体,该载体带有组氨酸标签,上面的基本元件也比较全,而且还可以根据自己的需要加或减序列
克隆载体则如楼上所说以TA载体为主
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