用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/08 10:43:20
![用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100](/uploads/image/z/9594962-26-2.jpg?t=%E7%94%A8%E7%9A%84pfu%E9%85%B6%2C%E6%8C%89%E7%85%A7%E8%AF%B4%E6%98%8E%E4%B9%A6%E7%9A%84%E6%AD%A5%E9%AA%A4%E8%B7%91%E7%9A%84PCR+%E7%BB%93%E6%9E%9C%E6%98%AF%E8%BF%99%E6%A0%B7%E7%9A%84%2C%E8%AF%B7%E9%97%AE%E6%98%AF%E4%BB%80%E4%B9%88%E5%8E%9F%E5%9B%A0%3F%E5%B7%A6%E8%BE%B9%E7%9A%84marker%E4%BB%8E%E4%B8%8A%E5%88%B0%E4%B8%8B%E5%A4%A7%E5%B0%8F%E4%BE%9D%E6%AC%A1%E4%B8%BA2000%E3%80%811000%E3%80%81750%E3%80%81500%E3%80%81250%E3%80%81100)
用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100
用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?
左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100
用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100
首先一个问题是你的胶做得不好,这种情况其实很简单就可以解决,配方正确的基础上,只要融化的完全,冷却的完全,就可以避免,为什么大家都那么着急,很多人的marker都这个样子,不要急于一时.
再有个你的目的条带如果是250左右那就问题不大,这次结果拖尾严重最主要是胶的问题.
如果不是250左右,但是又出现这个大小的条带,那么还是考虑一下引物的问题吧.
不管核算还是蛋白电泳做一个好的胶才是出好结果的关键啊
怎么看不到图。
那条250左右的条带是目的产物吗?如果不是,那你需要优化PCR条件。如果是,那也不奇怪,pfu的扩增效率经常比普通taq低。如果目的产物是250bp的话,你用pfu换不如用普通taq酶,普通taq虽然有错配,但是多挑两个克隆就可以了。我后来有做了不同温度的PCR 结果和上面的都是一样的!你那个700bp的产物用普通taq酶能PCR出来吗?...
全部展开
怎么看不到图。
那条250左右的条带是目的产物吗?如果不是,那你需要优化PCR条件。如果是,那也不奇怪,pfu的扩增效率经常比普通taq低。如果目的产物是250bp的话,你用pfu换不如用普通taq酶,普通taq虽然有错配,但是多挑两个克隆就可以了。
收起
我需要知道PCR出来的片段序列以便更好的分析。