作业帮用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/09/08 10:43:20
用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100
用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?
左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100
用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的PCR 结果是这样的,请问是什么原因?左边的marker从上到下大小依次为2000、1000、750、500、250、100
首先一个问题是你的胶做得不好,这种情况其实很简单就可以解决,配方正确的基础上,只要融化的完全,冷却的完全,就可以避免,为什么大家都那么着急,很多人的marker都这个样子,不要急于一时.
再有个你的目的条带如果是250左右那就问题不大,这次结果拖尾严重最主要是胶的问题.
如果不是250左右,但是又出现这个大小的条带,那么还是考虑一下引物的问题吧.
不管核算还是蛋白电泳做一个好的胶才是出好结果的关键啊
怎么看不到图。
那条250左右的条带是目的产物吗？如果不是，那你需要优化PCR条件。如果是，那也不奇怪，pfu的扩增效率经常比普通taq低。如果目的产物是250bp的话，你用pfu换不如用普通taq酶，普通taq虽然有错配，但是多挑两个克隆就可以了。我后来有做了不同温度的PCR 结果和上面的都是一样的！你那个700bp的产物用普通taq酶能PCR出来吗？...
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怎么看不到图。
那条250左右的条带是目的产物吗？如果不是，那你需要优化PCR条件。如果是，那也不奇怪，pfu的扩增效率经常比普通taq低。如果目的产物是250bp的话，你用pfu换不如用普通taq酶，普通taq虽然有错配，但是多挑两个克隆就可以了。
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我需要知道PCR出来的片段序列以便更好的分析。