T-DNA可能随即插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/20 13:18:20
T-DNA可能随即插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除
T-DNA可能随即插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化.在适宜条件下培养,收获种子
(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除 ,因为后者产生的 会抑制侧芽的生长.
(2) 为筛选出已转化的个体,需将T代播种在含 的培养基上生长,成熟后自交,收获种子(称为T代).
(3) 为筛选出具有抗盐性状的突变体,需将T代播种在含 的培养基上,获得所需个体.
(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体.为确定抗盐性状是否由单基因突变引起,需将该突变体与 植株进行杂交,再自交 代后统计性状分离比.
(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失,从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 .
(6)根据T-DNA的已知序列,利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段.提取 植株的DNA,用限制酶处理后,再用 将获得的DNA片段连接成环(如右图)以此为模板,从图中A、B、C、D四种单链DNA片断中选取 作为引物进行扩增,得到的片断将用于获取该基因的全序列信息.
第六问,为什么是bc而不是ad?不是从5’开始的吗?
T-DNA可能随即插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除
从BC开始5开始扩增的才是基因,如果是AD开始,扩增的是TDNA序列,这点要搞清楚