提的细菌DNA总是3条带是怎么回事我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/08/11 23:28:50
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提的细菌DNA总是3条带是怎么回事我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果
提的细菌DNA总是3条带是怎么回事
我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,
取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果菌体较少可再重复此操作。
2. 加400ul 裂解液(40mM Tris-醋酸,pH7.20mM 醋酸钠,1mM EDTA,1%SDS)。用微量吸管快速吹打,使其混匀。
3. 加200ul 5M NaCl,混匀后,12000rpm,此步骤可重复2次去糖。
4. 将上清液移至另一灭菌EP管中,加入等体积的苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),温和颠倒混合,12000rpm,离心3min,转移上清液,重复抽提。
5. 加入2倍体积的无水乙醇或异丙醇,沉淀DNA,用70%乙醇洗沉淀块2-3次,室温静止晾干。加入50ul TE缓冲液重新悬浮DNA,于-4℃下保存备用。
提的细菌DNA总是3条带是怎么回事我提的是细菌的全基因组DNA,电泳检测时,总是出现3条带。方法如下,取1.5ml 细菌液体培养物于灭菌EP管中,12000rpm,离心1min,弃去上清液,收集菌体,如果
细菌DNA总是3条带?考虑其中含有的质粒吧.
一般提取质粒DNA会出现三条带.
告诉你的提取方法 我帮你判断一下
分析原因:
1.如果提的是基因组,那么极有可能是基因组被打断了,提的时候要一定轻柔,这点超级注意,像对女孩子一样。
2.如果提的是质粒,那么它本身就是3条带,因为有3种形式的,超螺旋,线性和开环。
3.最后一种可能是提出来的东西很混乱。...
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分析原因:
1.如果提的是基因组,那么极有可能是基因组被打断了,提的时候要一定轻柔,这点超级注意,像对女孩子一样。
2.如果提的是质粒,那么它本身就是3条带,因为有3种形式的,超螺旋,线性和开环。
3.最后一种可能是提出来的东西很混乱。
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说明你提出的DNA不纯,存在三种DNA的空间状态。
琼脂糖电泳进行鉴定质粒DNA时,多数情况下你能看到三条带,但千万不要认为你看到的是超螺旋、线性和开环这三条带。
碱法抽提得到质粒样品中不含线性DNA,不信的话你用EcoRI来线性化质粒后再进行琼脂糖电泳,就会看到线性质粒DNA的位置与这三条带的位置不一样。
其实这三条带以电泳速度的快慢而排序,分别是超螺旋、开环和复制中间体...
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说明你提出的DNA不纯,存在三种DNA的空间状态。
琼脂糖电泳进行鉴定质粒DNA时,多数情况下你能看到三条带,但千万不要认为你看到的是超螺旋、线性和开环这三条带。
碱法抽提得到质粒样品中不含线性DNA,不信的话你用EcoRI来线性化质粒后再进行琼脂糖电泳,就会看到线性质粒DNA的位置与这三条带的位置不一样。
其实这三条带以电泳速度的快慢而排序,分别是超螺旋、开环和复制中间体(即没有复制完全的两个质粒连在了一起)。
如果你不小心在溶液II加入后过度振荡,会有第四条带,这条带泳动得较慢,远离这三条带,是20-100kb的大肠杆菌基因组DNA的片断。
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