如何使基因在原核生物中表达

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/19 10:37:38
如何使基因在原核生物中表达
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如何使基因在原核生物中表达
如何使基因在原核生物中表达

如何使基因在原核生物中表达
1.获取目的基因:最简单的是直接从cDNA文库找,不然就要自己用mRNA逆转录出cDNA,然后PCR,电泳检测,回收.
2.酶切和连接:找一个质粒载体,根据载体的说明书选择内切酶,一般是双酶切.把载体和你的目的片段用一样的酶切了,然后混合了连接.
3、转化:找一种工程菌,把它弄成感受态,把你连接好了的重组质粒和菌混了,让质粒钻到菌里面去.
4、检验(筛选培养):看看质粒进到菌里面没有,目的基因连接到了质粒上了没有,一般是蓝白斑+抗生素抗性+电泳.
5、诱导表达:加入诱导剂,等着菌表达
6、检测,看看产物出来没有,量多少、有没有活性,etc.
完了,具体问题具体分析,思路以上.

可以让真核生物的mRNA为模板,逆转录得到不含内含子的基因片段,再与运载体结合,导入原核生物细胞即可。

如何使基因在原核生物中表达 真核生物基因在原核生物里表达 应如何操作 外源基因在原核生物中表达必须具备哪些条件 为什么人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原有无生物活性 谁知道为什么人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性? 请问:真核生物的基因在原核生物基因进行表达时的注意事项 有哪些? 原核生物怎样才能合成真核生物的蛋白质从真核生物中分离到的完整的基因片段,若该基因需要通过大肠杆菌表达获得相应的蛋白质,该如何操作? 阐述原核生物基因表达调控途径 说明原核生物基因表达调控的特点? 真核生物基因和原核生物基因的表达有哪些主要差异? 克隆某生物中的某个基因.已知此基因已在其它生物中被克隆.假设这种生物是一种原核生物,应如何设计该实验? 真核基因在原核细胞中如何表达 原核生物如何表达遗传信息原核生物没有RNA,如何表达? 反转录的基因没有非编码区能够表达吗?反转录得到的目的基因不是没有非编码区吗?非编码区其调控作用,那在基因工程中导入原核生物体内的基因能正常表达吗?是不是原核生物没有切去非编 原核生物的基因表达调控为什么发生在转录水平,而不发生在翻译水平? 含有内含子的DNA片段导入原核生物的基因中能表达吗?有什么影响? 如何构建某一个基因的原核表达载体