引物在NCBI上电子扩增显示是特异的,扩增出来却是三条带,目标带很明显1.6K,下方有一条0.3K的带和二聚体请问这是什么原因呢?

引物在NCBI上电子扩增显示是特异的,扩增出来却是三条带,目标带很明显1.6K,下方有一条0.3K的带和二聚体请问这是什么原因呢? 特异引物PCR问题各位大牛,小弟初涉分子生物实验,最近在用设计好的特异性引物扩增保守序列,可是总也是扩增不出来,常常是只有引物二聚体,没有任何扩增条带,我也试着在引物报告单上所给 请问在ncbi上blast的时候,需要去除pcr扩增引物序列吗?如题,在blast的时候是否要保留当时做dna扩增时的pcr引物序列.……以前做的一个系列是通过提取重组质粒测序,不去引物的,但是现在做的内 如何在NCBI上寻找要扩增的序列?我要用PRIMER 设计引物.位点是CYP2C19*2,是一个SNP的位点.我在NCBI里查到了这个基因的信息.现在我有3个问题如下：1.引物设计的对象是FASTA中的序列还是GENEBANK中的 我扩增的这段片段能否提交到NCBI GENEBANK?我根据已报道的cDNA全长序列,用特异引物扩增了一段保守的片段,用作探针.这段片段1kb,原来的全长是3.5kb.我得到的这段片段能否提交到genebank里?我为了 引物是如何扩增形成引物二聚体的? 什么是上游引物和下游引物?麻烦再问一下：上下游引物是不是多用在多对引物的扩增中？？？谢谢 PCR引物放在-20冰箱里半个多月后,有可能失活吗?或者说,是扩增DNA的引物 mRNA差异显示原理中随机引物是如何生成的,另外10 mer 的随机引物中的10 还有为什么20种随机引物和12种锚定引物就可以扩增出所有的mRNA了, 基因的PCR扩增出现非特异扩增产物,何故? microRNA茎环引物及PCR上下游引物设计和扩增原理我在文献上看到一些用茎环引物反转录microRNA时,接下来的PCR的上游引物是包含了microRNA的5‘端一部分序列,而下游通用引物则为茎环上的一部分 引物发夹结构我用的是文章里面的引物,与NCBI里面的序列比对,符合度100%,279bp大小,但是就是扩增不出来目的片段,只有引物二聚体,现在我想比对下,看看我用的引物是不是有严重的发夹结构,请 谁能通俗易懂的给我解释一下PCR反应过程中,引物与模板如何结合?扩增出来的是上下游引物之间的片段呢?还是就是引物片段?最终目的不是扩增目的基因,观察多态性的. PCR扩增基因设计引物时,用Primer5检测上游引物和下游引物的互补性,显示free energy= 1.50 Kcal/mol这样的引物可用吗? 设计引物时,扩增产物的长度是如何知道 引物设计软件从哪搜索引物?很多引物设计软件里,选项是SEARCH,不明白从哪搜索的……还有blast验证引物是什么原理？是不是必须在NCBI里面有的序列才能验证？ 关于PCR合成的问题PCR扩增方向是5‘到3’,那它用的引物在扩增的时候方向是怎么的呀? 同一模版DNA在进行PCR扩增时是不是需要不同的两种引物?为什么资料上说引物只要Tm值相似就行?