3400bp的基因PCR时怎样设定程序,尤其是延伸的时间?求指教

3400bp的基因PCR时怎样设定程序,尤其是延伸的时间?求指教 大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp pcr条件设定：我要p一个2000+bp的片段 pcr条件怎样设我的两个引物都是33bp GC含量为43% p过两次 都是引物二聚体 小片段DNA的PCR扩增程序我要扩的DNA片段138KB扩了很多次都没有扩出来,想问问大家,谁扩过这么小的片段,PCR程序是怎么设定的本人要扩增的是138bp的小DNA,怎么也扩不出来,不知道该怎么办.我的上 做pcr时最后保存4度的时间应该以多少为宜?程序设定是10分钟,我在做PCR时由于赶时间,十分钟还没有到就结束了PCR过程,请问会影响到结果吗? 怎样理解PCR技术是获取目的基因的途径? PCR的退火温度怎么设定 基因的PCR扩增与人工合成问题?如果目的片段比较短,小于50个bp,是采用PCR扩增还是人工合成呢? PCR 我P的是两个基因 前两个样品的目的片段是612bp 后两个是672bp 请问P出来了吗? 荧光定量PCR结果CT值输出问题荧光定量PCR程序设定的是absence/presence,得到的结果没有CT值,请问是这个程序本来就不会显示CT值,还是输出值的方法有问题? 怎样用actin基因检测反转录结果?PCR程序.谢谢! PCR产物为什么会出现100~200bp的条带我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有 设计性实验:PCR基因扩增(在线等……)已知PaDREB基因长为600bp左右,请通过PCR扩增获得DNA片段. 要求从引物设计,PCR反应体系和反应程序方面设计该实验.片段如下:ATGGATTATTCGCAGTACGG…………CGTCCTTGTGG 设计性实验:PCR基因扩增(在线等)已知PaDREB基因长为600bp左右,请通过PCR扩增获得DNA片段.要求从引物设计,PCR反应体系和反应程序方面设计该实验.片段如下:ATGGATTATTCGCAGTACGG…………CGTCCTTGTGGAACGATTA PCR反应温度怎么设置?由于刚刚开始做实验,什么都不懂,PCR引物的Tm值一条为50.6一条为54.3目标片段为195bp请问PCR反应程序该怎么设计啊? PCR时,如果上下游引物Tm值相差较大该怎样设定反应程序?反应后有非特异性条带出现,只有一条,该怎样去除? 我想问PCR反应程序如何设定?应注意那些问题? PCR反应过程中由于程序设定错误需要中途停下来重新开始,是否会有影响?