做PCR反应为什么在循环结束后要有5min延伸反应?是指整体35次循环结束后的5min延伸反应

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/15 21:25:16
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做PCR反应为什么在循环结束后要有5min延伸反应?是指整体35次循环结束后的5min延伸反应 做PCR反应为什么在循环开始前要热变性5min再正式进入第一次的循环 PCR反应的循环前和循环后的温度和时间做pcr除了必要的变性,退火,延伸的温度和时间,还需要在循环之前设定一个温度和时间,循环完成之后也要设定个温度和时间,最后还有个保存的时间,我想 实时荧光定量PCR后反应体系出现蒸发,用的是ABI 7500我做实时荧光定量PCR,有两个问题要解决:1.PCR之后发现反应体系减少了,可能是因为蒸发了,但是我在PCR之前使劲盖紧盖子了,为什么还会减少. 在PCR反应中,只有一个DNA片段作模板,经n次循环后,含引物的单链总数是 PCR循环次数是否越多越好?为什么 反转录获得cDNA后,为什么还要做RT-PCR? 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? PCR为什么要在冰上操作?做PCR的时候,如加各个反应液Taq酶,引物,dNTP,模板,PCR buffer等要在冰(冰盒)上操作?初次操作,敬请答复. 荧光定量pcr中关于阈值的设置是否会影响Ct值?我用的荧光定量PCR仪为ABI7500,按照说明书,PCR结束后需要对每个反应的阈值和基线进行手动调整,但是在模板相同的条件下,不同批次的反应之间的 PCR预变性和循环完成后继续72℃延伸5~延伸的具体过程是怎样的?我是想知道为什么要延伸? 配置PCR反应体系为什么要在冰上操作 做RACE,设计引物合成回来后,PCR反应体系是什么?(加UPM的)为什么扩增后什么也没有,marker挺清晰 为什么PCR反应结果不稳定 关于PCR的问题?问一个,PCR在变性,退火,延伸的循环前后各有一个单独的94度5分钟,72度5分钟,这两个是做什么用的,如果不加行不行? 如何确定pcr反应中最佳循环数我收到杂志的修改说明,让我说一下如何确定的rt-pcr反应循环数,我的是25个循环,我当时只是参考文献没有做梯度pcr确定,现在也不确定25个循环是否到了平台期,我 PCR结束后产物的处理PCR扩增结束后看到有书上说要10000rmp离心5min,将下层水相转入新的0.65mlEP管中,-20℃保存.还是可以不用上述处理直接跑电泳,这样做可以吗 最近在做实验RT-PCR,我做RT-PCR,一对引物Tm值分别是52.2,54.6.目的片段1062,PCR反应条件怎么设置呀