影响PCR扩增结果的因素请问影响PCR扩增结果好坏的因素有哪些,最重要的因素又是什么呢?可能我问的不是很清楚，其实主要是想问操作中需要注意的事项，引物是已经确定的，呵呵，不好意

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/12/02 14:12:47
影响PCR扩增结果的因素请问影响PCR扩增结果好坏的因素有哪些,最重要的因素又是什么呢?可能我问的不是很清楚，其实主要是想问操作中需要注意的事项，引物是已经确定的，呵呵，不好意
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影响PCR扩增结果的因素
请问影响PCR扩增结果好坏的因素有哪些,最重要的因素又是什么呢?
可能我问的不是很清楚，其实主要是想问操作中需要注意的事项，引物是已经确定的，呵呵，不好意思，我以前没有做过这方面的实验，觉得有点盲目，请多多指教。

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我个人感觉对PCR影响最大的是模板质量和退火温度,至于其他的影响因素那就太多了,模板纯度浓度,引物质量,体系中的物质（buffer,酶,Mg2+,dntp浓度）,退火和延伸温度.一般来讲,引物从reference上找,然后参照reference上的体系稍作调整即可,有需要直接HI我吧,我不一定在,看到给你回

最重要的应该就是引物的特异性了,要不然连PCR出来的片段是不是所需的片段都不能确定...
引物的设计很有技巧的,既要保证特异性,又不能过长,两端的引物退火温度还要相似才好.现在有很多软件可以帮助你设计软件,推荐Primer Premier 5,很好用~
ps 注意事项就是东西都要加全了,一般要设计对照组,PCR仪的稳定性和你使用的不同公司的酶的效率很不同,不成功也不要灰心.反应的...

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最重要的应该就是引物的特异性了,要不然连PCR出来的片段是不是所需的片段都不能确定...
引物的设计很有技巧的,既要保证特异性,又不能过长,两端的引物退火温度还要相似才好.现在有很多软件可以帮助你设计软件,推荐Primer Premier 5,很好用~
ps 注意事项就是东西都要加全了,一般要设计对照组,PCR仪的稳定性和你使用的不同公司的酶的效率很不同,不成功也不要灰心.反应的条件不是所有都一样的,你要看你使用的那个公司的酶给的说明书,上面很详细~生物实验失败还是很常见的,千万不要轻易放弃,耐心找原因,祝你成功~!

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引物的特异性
退火温度
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影响RT-PCR扩增产物因素 影响PCR扩增结果的因素请问影响PCR扩增结果好坏的因素有哪些,最重要的因素又是什么呢?可能我问的不是很清楚，其实主要是想问操作中需要注意的事项，引物是已经确定的，呵呵，不好意 Mg2+离子浓度影响PCR扩增效率的机制?为什么浓度过高降低pcr扩增特异性,浓度过低影响PCR扩增产量? 关于PCR扩增的问题请问用全血提取的DNA用紫外分光光度计测得有蛋白污染或者RNA污染,会影响PCR扩增吗? 引物不含保护碱基,PCR扩增结果有什么影响 影响PCR反应效率的因素有哪些?如何有效地提高PCR反应的效率?pcr产物的回收效率，求影响其回收效率的因素。 PCR扩增时循环数太多,会对扩增有什么影响? 关于PCR扩增技术的 影响pcr反应的因素有哪些? PCR扩增中,降低退火温度、延长变性时间对反应有何影响 DNA中混有RNA会影响PCR结果吗求解答 PCR的扩增基因的引物是什么 什么是PCR技术的非特异性扩增? ssr的PCR扩增产物如何检测 如何判断PCR扩增效率的一致性 基因的PCR扩增技术原理是什么? pcr 扩增的是整个基因吗 PCR扩增不出来条带的原因?