PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/27 13:04:46
PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带
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PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带
PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带

PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带
如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件:
1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列;
2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有目标条带,即使可能并不清晰;
3.选取最清晰的温度,在PCR体系中设置镁离子浓度梯度,选取最理想的条件.
如果是以前曾经成功扩增、现在条件一样却没法重复的,个人经验要特别注意下模板DNA的质量、尤其是PH值.另外由于不清楚您实验的细节、所用试剂和反应条件,如有误解还请见谅...


能问具体点吗?

PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 普通PCR 为什么只有引物二聚体没有目的条带? RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了 关于PCR的问题:PCR如果目的基因扩增出来了是不是条带中的引物二聚体就没有了呀? RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u PCR之后电泳没有条带,连引物二聚体都没有?这是怎么回事了?PCR一直都没出现过引物二聚体,引物二聚体是在溴芬兰的前面么? 我做转基因植物,最近一直做PCR鉴定,但只有引物二聚体,原因会有哪些?转同样的基因,在转基因烟草的PCR鉴定时,能P出目的条带,而且我用的是相同的条件来做我的却得不到结果.会不会和物种有 请问小鼠的DMC1基因是普通的基因吗?不是特殊基因吧.用该基因设计引物,以CDNA为模板,PCR后只有引物二聚没有目的条带,退火温度做了梯度,还是没有条带.是什么原因呢,我的同事用相同的模板, 小鼠基因型鉴定 没有目的条带和内参 只有引物二聚体我做的是小鼠基因型鉴定,采用的是25nM NaoH/0.2mMEDTA 40mM Tris HCl PCR 基因组DNA模板测定 显示DNA含量0.997ug/ul 但OD260/OD280=1.1 做PCR的时候没有目 PCR产物问题如图~第一张是taq酶跑出来的条带~有产物,大小780bp~marker是DL2000而第二次是高保真酶跑出来的电泳图,没有我的目的产物,只有很多二聚体这是为什么呢?我用的引物都是一样的~2次PCR PCR扩增目标基因,完全没有条带.是不是设计的引物太短?引物只有10个碱基和模板配对 PCR扩增1829BP的片段,一对引物的Tm都是64度,退火温度已经试过55和50度都没有目的条带,请教pcr设置参数在55和50度只看到引物二聚体且有拖尾现象,没有目的条带 pcr 条件我做了IGF-1基因5'调制区的,按照别人发的文章条件跑的PCR,自己又优化了条件,结果PCR产物经检测,有目的条带,但好像在100bp下面有一条条带,我怀疑是引物二聚体.请问各位有什么办法能 pcr产物的问题~高手进如图~第一张是taq酶跑出来的条带~有产物,大小780bp~~~marker是DL2000而第二张是高保真酶跑出来的电泳图,没有我的目的产物,只有很多二聚体这是为什么呢?我用的引物都是一 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? 为什么用srap引物跑PCR只有一条带我的模板是火龙果的DNA,模板的质量是过的去的,进行其他扩增是可以的.但是用SRAP引物就不正常了.扩增程序应该没有问题,因为PCR结果可以看到有引物二聚体的 为什么用srap引物跑PCR只有一条带?我的模板是火龙果的DNA,模板的质量是过的去的,进行其他扩增是可以的.但是用SRAP引物就不正常了.扩增程序应该没有问题,因为PCR结果可以看到有引物二聚体