作业帮蛋白水解酶配制
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/15 17:48:41
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蛋白水解酶配制
蛋白水解酶配制
蛋白水解酶配制
a：链霉蛋白酶是从链球菌（streptomyces griseus）中分离到的一种丝氨酸酶和酸性蛋白酶的混合物.
b：自消化可消除dna酶和rna酶的污染,经自消化的链酶蛋白酶的配制方法如下：把该酶的粉末溶解于10mmol./l tris·hcl(ph7.5)、10mmol/l nacl中,配成20mg/ml浓度,于37℃温育1h.经消化的链霉蛋白酶分装成小份放在密封试管中,保存-20℃.
c：蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,从林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中纯化得到.该酶有两个ca2 结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系.然而,如果从该酶中除去ca2 ,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质.所以,蛋白酶k消化过程中通常加入edta（以抑制依赖于mg2 的核酸酶的作用）.但是,如果要消化对蛋白酶k具有较强耐性的蛋白,如角蛋白一类,则可能需要使用含有1mmol/l ca2 而不含edta的缓冲液.在消化完毕后、纯化核酸前要加入egt（ph8.0）至终浓度为2mmol/l,以鳌合ca2 .
太专业了，要问化学老师1