PCR结果呈弥散状是什么原因造成的我上个星期跑完PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/28 15:47:47
PCR结果呈弥散状是什么原因造成的我上个星期跑完PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都
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PCR结果呈弥散状是什么原因造成的
我上个星期跑完PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一遍了还是找不到原因,结果照旧,谁能告诉我这可能是什么原因造成的,小女子感激不尽

PCR结果呈弥散状是什么原因造成的我上个星期跑完PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都
退火温度较低导致的非特异性扩增是造成你遇到问题的原因.你可以通过Touch Down PCR或者梯度PCR摸索最佳退火温度后重新进行PCR.

有杂质吧...

毛吉杨说要升高TM温度，我就遇到过那样的问题，升了就好了

跑完PCR后，产物最好是当天电泳。时间长了会降解。镁离子、dNTP等这些都会影响PCR结果的，退火温度也很重要，最好优化一下，找到最适退火温度。

1 模板浓度太高了，结果模板不能很好地和引物结合而自结合了
2 镁离子浓度高了，可能buffer里含有镁离子，你又加了一遍
3 单纯的退火温度问题也许不会造成全部弥散，适当提高些就好，一般比推荐温度高2-3度就可以
4 也许你看到的根本就不是扩增产物，你的引物不合适
5 最好给出你目标片段的大小或是范围，再说下你的程序，大家好帮你看看
6 做个肯定能扩出来的...

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1 模板浓度太高了，结果模板不能很好地和引物结合而自结合了
2 镁离子浓度高了，可能buffer里含有镁离子，你又加了一遍
3 单纯的退火温度问题也许不会造成全部弥散，适当提高些就好，一般比推荐温度高2-3度就可以
4 也许你看到的根本就不是扩增产物，你的引物不合适
5 最好给出你目标片段的大小或是范围，再说下你的程序，大家好帮你看看
6 做个肯定能扩出来的东西一起电泳，检查下是不是你的药品或设备有问题
哥哥我能想到就这些了

收起

1.你的引物是不是特异性不高？
2.延伸时间够不够长，一般是1k--1min？
3.退火温度是否过低？
4.电泳的问题应该不大，重新换个模板试一下。

是不是提纯没有做好呢，你再提纯做一次试试，要是你的样品本来就有问题的话你在怎么做都是无用功

PCR结果呈弥散状是什么原因造成的我上个星期跑完PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都 我的PCR条带弥散,阴性对照也弥散,但是不加引物不弥散,当然也没有条带,请问都是什么原因啊? pcr电泳出现模糊团状条带是什么原因造成的 您好.我最近的PCR扩的产物成弥散状,但是能看见目的条带,这是怎么回事啊,我之前试条件时都没有弥散这样的产物酶切能切吗? 请问实时定量PCR的绘制溶解曲线应该从多少度开始升温?我的实验结果里,溶解曲线在55度时候有个小峰,请问可能是什么原因造成的? 如何消除PCR的拖尾PCR扩增出来有目的条带,但是有拖尾,呈弥散片 PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么前几次做的结果都挺好的,条带很清楚,亮度也可以,就是不太齐,但是最近几次几乎没有目的带,都是弥散的,从头到尾,我用的东西都是一样的,条件也没变 肝脏组织中atf2 基因cDNA的PCR程序快纠结死我了,我用以下程序跑电泳出来的结果几乎总是弥散,看不到目的条带.F:CCGAGATCTatgagtgatgacaaaccctttctat 有BGI2 酶切位点G:CCGGTTAACtcaacttcctgagggctgtg 有HPA1 酶切位 PCR出现大分量弥散条带?电泳RNA时无DNA条带.可能是什么原因? PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题,我把所有的酶,buffer,Mg+都换了一遍了还是找不到原因,结果照旧,重新合成了 二次PCR的产物电泳图观察,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾, 哪位高人看过PCR跑电泳跑成这个样子的?这是什么原因造成的?望指教. PCR产物跑电泳时发生拖尾,这是什么原因造成的? 请问PCR过程中目的条带不够亮,是什么原因造成的?应如何解决? PCR产物跑电泳时发生拖尾,这是什么原因造成的? 请问PCR过程中目的条带不够亮,是什么原因造成的?应如何解决? 我的皮肤黄,是什么原因造成的? 电泳PCR结果比Marker最小片段还靠前,是什么原因提取叶蜂的DNA后,用COI的引物PCR扩增,电泳结果比Marker最小片段还靠前.老师说可能是引物二聚体,但不能确定,请教各位专家是什么原因造成的?