空质粒pEGFP-N1能用菌液PCR鉴定吗?

空质粒pEGFP-N1能用菌液PCR鉴定吗? 您好 pEGFP质粒进行PCR得到的产物是什么 pegfp-n1能在原核中表达吗?就是在导入了pEGFP-N1这个质粒后,在大肠杆菌中能表达GFP蛋白吗? 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了 我构建一个H2B-pEGFP-N1载体,但是pcr鉴定正常,酶切鉴定就是没有急死啦,感受态,酶切时间和酶都换过了我的那个要求说不能尽量避免引物二聚体,不过我的引物有,是不是只能重新设计引物了,还是 pegfp-n1含有AMP抗性基因么 （鉴定质粒表达）比较菌落PCR和提质粒酶切这两种方法的优缺点,为什么需要两次鉴定? 重组质粒鉴定pcr没条带,酶切有条带我有两种重组质粒,两个基因片段大小一样,我的重组质粒都与空质粒大小相差300左右,但是用0.9%的胶140v电泳,无法区分大小,重组质粒进行双酶切,都出现了疑 pEGFP-CI适合转染生精细胞吗,文献上都是pEGFP-N1转染的. 重组质粒后为什么还需要双酶切、PCR鉴定并测序分析 重组质粒后为什么还需要双酶切、PCR鉴定并测序分析 通过16srDNA鉴定细菌的疑惑1、为什么不能把PCR所得溶液直接用来测序,是测序技术的限制么?提供给测序公司的应该是转化阳性的菌液,还是提取出来的质粒?2、pcr产物跑胶后要胶回收再做载体连 真核重组质粒构建需要pMD18T载体么?我现在构建真核重组质粒,是合成引物,pcr出目的片段,目的片段的双酶切胶回收、pEGFP-C1质粒的双酶切胶回收,T4连接酶连接,转化,送去测序.想问下这步骤对么? 质粒和PCR已纯化为什么要用双蒸水溶解而不用能用TE 菌落PCR技术鉴定阳性重组菌落PCR扩增的序列是环状的质粒,还是线性的质粒呢?那载体通用引物是什么呢?用它扩增的是哪段序列呢? PF用带目标基因的质粒(pEGFP-N1）转染HepG2细胞,用G418筛选稳定表达株10天,GFP表达减弱减少.目的基因和GFP构成融合蛋白,转染后24小时,空载表达GFP70%,但目的基因表达GFP很弱很少,经筛选后,连空载 酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶 分子克隆的时候,提出的质粒用菌落PCR是阳性的,但是酶切鉴定的时候却没有切出来目的条带,是怎么回事呢?