作业帮为什么要柱效检测?具体步骤怎么弄?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/07/27 09:45:04
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为什么要柱效检测?具体步骤怎么弄?
为什么要柱效检测?具体步骤怎么弄?
为什么要柱效检测?具体步骤怎么弄?
固定柱床层析是一种多功能的分离技术,常用于生物医药的分离中.
无论是在保证纯化过程的稳定性还是保证最终产物的安全性上,填充柱的制备和质量认证都是极为重要的步骤.
即使柱效检测不能作为单一参数对后期的纯度和回收率进行预测,至少在启动纯化工艺前可作为一种快速途径对层析柱和设备性能进行检测.所以需要检测柱效.
1,系统准备
对系统和管道进行润洗准备
清除在包装、储存或运输过程中累积在管道和分流系统中的空气
将层析柱置于1.5 柱体积以上的洗脱液中进行平衡.若柱平衡在盐溶液中进行,则需要保证出口的电导和入口的电导一致.平衡时的液流方向需与测试时一致.测试方向既可向上流也可向下流.
2,运行脉冲柱效检测
将提前准备好的一定体积的样品（1%柱体积）加载于柱上,上样最好采用样品环,超级容量杯或样品泵.
3,通过测定峰宽和对称性评价
相对峰宽通常用一定数量的理论塔板（N）,
一个理论塔板的等价高度（HETP）
颗粒半径 （d/P）
或更常用折合了的塔板高度（h）来进行描述：
h=HETP/d/P 对称性As
对称因子As 描述了与理想高斯峰形状的偏差,通过对10%
峰高处的峰宽进行计算得到：
As=b/a