在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/28 17:53:17
在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase
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在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase
在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase

在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase
一般两种办法,首先是每50ul体系中加入2ul 0.5M的EDTA然后80度水浴2分钟.另外一种是将50ul体系稀释到100ul然后加入等体积酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)混匀后12000rpm室温离心5min转上清,然后再加入等体积氯仿:异戊醇(24:1),混匀后12000rpm室温离心5min,转上清.在上清中加入10ul 3M的醋酸钠和250ul冷乙醇,-70度放置20min.4度12000rpm离心10min,弃上清.70%冷乙醇洗涤1次,然后干燥.最后沉淀用RNase free 的水溶解.个人建议用第一种方法,第二种方法太耗时间而且RNA回收率也低.

为什么要在RNA中加DNase,这东西是用来处理稀释用水的