作业帮在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/02 21:28:36
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在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase
在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase
在提取的RNA中加入DNase后如何灭活DNase
一般两种办法,首先是每50ul体系中加入2ul 0.5M的EDTA然后80度水浴2分钟.另外一种是将50ul体系稀释到100ul然后加入等体积酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）混匀后12000rpm室温离心5min转上清,然后再加入等体积氯仿：异戊醇（24：1）,混匀后12000rpm室温离心5min,转上清.在上清中加入10ul 3M的醋酸钠和250ul冷乙醇,－70度放置20min.4度12000rpm离心10min,弃上清.70%冷乙醇洗涤1次,然后干燥.最后沉淀用RNase free 的水溶解.个人建议用第一种方法,第二种方法太耗时间而且RNA回收率也低.
为什么要在RNA中加DNase，这东西是用来处理稀释用水的
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关于提取DNA时加入金属离子螯合剂的问题在提取DNA时,会加入EDTA,柠檬酸钠等金属离子螯合剂,螯合dnaseⅠ所需的镁离子,使dnaseⅠ失去活性,可不能螯合锰离子,而锰离子也可使dnaseⅠ具有活性,这
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