做革兰氏染色实验最关键是哪一步,为什么?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/27 12:01:54
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革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法.1884年由丹麦医师Gram创立.
细菌先经碱性染料结晶紫染色,再经碘液媒染(以增加染料与细胞的亲和力)后,用酒精或丙酮脱色,再用复染色剂染色.不被脱色而保持原颜色者为革兰纸阳性菌(G+);被脱色后又被染上复染剂的颜色者为革兰氏阳性菌(G-).此法可将细菌分为两大类.
革兰氏染色的机理主要是利用两类细菌的细胞壁成分和结构不同.革兰氏阴性菌的细胞壁中含有较多的类脂质,而肽聚糖的含量较少.当用乙醇或丙酮脱色时,类脂质被溶解,增加了细胞壁的通透性,使初染后的结晶紫和碘的复合物易于渗出,结果细胞被脱色,经复染后,又染上复染液的颜色;而革兰氏阳性菌细胞壁中肽聚糖的含量多且交联度大,类脂质含量少,经乙醇或丙酮洗脱后,肽聚糖层的孔径变小,通透性降低,因此,细胞仍保留初染时的颜色.
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