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来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/16 01:58:29
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real time pcr检测几个基因的表达量,现在提取rna后做逆转录,买的takara的逆转录试剂盒,不知道应该选随机引物还是oligo dT引物?我是小白,请大家给予建议啊

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显然是选random primer更好,其实说明书是有写的啦,原因是RT-PCR逆转录是要得到一个所有的RNA的cDNA库,然后再P出你要的“几个基因”,所以不是每个基因的mRNA都是有polyA的,很多都是没有的,microRNA,piRNA,很多都没有哦,所以如果你用oligo dT引物,就自然会miss掉很多(确实是很多)的RNA,而随机引物不会有这个问题,用它反转录出来的cDNA丰度更高,结果更加准确!