IPTG诱导表达后的蛋白上样问题经过IPTG诱导完成后的大肠杆菌BL21（DE3）进行SDS-PAGE蛋白检测诱导表达效果,对菌体该如何处理?

IPTG诱导表达后的蛋白上样问题经过IPTG诱导完成后的大肠杆菌BL21（DE3）进行SDS-PAGE蛋白检测诱导表达效果,对菌体该如何处理? IPTG诱导表达的作用原理是什么? 诱导大肠杆菌表达时IPTG的量 IPTG诱导BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白表达的最佳温度,时间,IPTG的浓度,诱导时菌液的最佳浓度. 我用BL21（DE3）菌株表达一外源基因,用IPTG诱导,为什么我不加IPTG的对照组也会有目的蛋白的表达呢? 不用IPTG诱导的重组蛋白能在BL21中表达吗,如果表达经SDS-PAGE电泳后能看到条带吗,.我最近在做重组蛋白的表达,我构建好了一个重组载体,启动子是不用IPTG诱导表达的,我跑了两次电泳结果都没 诱导表达时IPTG加的时间太早有影响吗? 不用iptg诱导,蛋白会表达吗我做原核表达,载体为pet30a,转到BL21中,没有加入IPTG的菌液和加入IPTG 的菌液跑SDS-PAGE,在预测蛋白大小处均有蛋白表达,不知道什么原因为了确定是否为我的目的蛋白, 为什么用IPTG诱导蛋白没表达?双酶切及PCR验证目的片段连到表达载体pET28a上了(所用的内切酶是BamH1,Hind111).重组质粒转化BL21,试了不同的IPTG浓度,诱导温度,就是没蛋白表达.后来重组质粒转化JM10 原核基因在大肠中表达存在密码子偏爱性吗?我在做芽孢杆菌一个蛋白的异源表达,基因克隆了,用的pET-28a,表达菌株是BL21(DE3)pLysS,测序也没有问题,25℃、30℃、37℃都诱导了,IPTG为0.5mM.可就是不 IPTG的浓度换算问题生物中加样量如何计算?如诱导细菌表达时加IPTG至终浓度1mmol/L,如果菌液是5ml,那么加入IPTG的体积是5ul,那么此时IPTG配制的浓度是多少,才能这样加入正好是5ul呢? IPTG的诱导问题我在做诱导是遇到这样一个问题,做了0小时,1,2,3,4,5小时的诱导,可是诱导的蛋白并没有随时间增加而增加,0小时没有,1,2,3,4,5的蛋白量差不多的, 蛋白表达时操作方法对结果有影响吗我做的原核表达,试过低温诱导、低浓度IPTG诱导、不同时间诱导、扩大培养加葡萄糖,但是怎么都没有结果,是因为我操作的原因吗?载体说明书上说在超声 Ni-NTA纯化问题,获得不了纯的目的蛋白!我们用的是导入质粒的大肠杆菌,然后用IPTG诱导,然后将细菌裂解.去掉细菌沉淀,上清过柱,然后用浓度为20mM,40mM,60mM,100mM,150mM,200mM的含有咪唑的洗脱液洗脱 BL21中的表达载体为什么要用IPTG诱导 用不同的大肠杆菌菌株进行乳糖操纵基因的诱导表达时,对iptg的需求有何不同 蛋白质表达一般的条件?本人最近在做蛋白质的诱导表达,我想知道一般的诱导条件是什么?就是诱导时间和加入诱导剂之后的培养时间和条件,以及IPTG的浓度? 如何通过调节IPTG的浓度和温度来控制蛋白质表达速度,从而提高蛋白的可溶性