请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/27 14:50:46
请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学
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请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学
请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么
我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学的跑出条带来,我的却没有,补充一下,我的是菌体全蛋白》,他们说是我的样本浓度太高了,电泳不出来,请问是这种原因么????

请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学
可能有以下几个原因:
一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)
二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的
三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是共轭双键的吸收波长,很多物质都会有吸收,如果做亲和层析时咪唑也有吸收,RNA在280下也有吸收,可能你测得的是RNA?
最后,想问问你的蛋白质Marker有没有显示条带?

可能原因:
1. 上样太少。10ul就够了。注意变性时不要有太多沉淀,点样时要沉在点样孔底部。
2. 染色问题。marker正常吗?
3. 浓度测定不准。
有可能。浓度太高变性时会沉淀,进不去胶。不过2.0mg/ml也不算太高。加loading buffer后混匀,再加热。...

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可能原因:
1. 上样太少。10ul就够了。注意变性时不要有太多沉淀,点样时要沉在点样孔底部。
2. 染色问题。marker正常吗?
3. 浓度测定不准。
有可能。浓度太高变性时会沉淀,进不去胶。不过2.0mg/ml也不算太高。加loading buffer后混匀,再加热。

收起

是不是时间不够?

怎么测的浓度啊。。。

请问我提取蛋白,测浓度是2.0mg/ml,可是做sds-page电泳却看不到条带,不知道原因是什么我是让同学帮我跑的电泳,用时2.5个小时,我用的是试剂盒定量的,Bradford法》,用的波长是570nm。我同学 为什么我用BCA蛋白试剂盒测定蛋白浓度时,测得的浓度和我估计的浓度相差那么多呢?起先配置的6mg/ml,然后稀释3倍,浓度在2mg/ml左右,但是测得只有0.5mg/ml,这是什么原因呢? 如何用10mg/ml的蛋白液配置2.0mg/ml的标准蛋白液 考马斯亮兰法绘制标准蛋白曲线时,用1.0mg/ml和0.1mg/ml标准蛋白溶液测得的吸光度有重叠如何确定蛋白浓度?0.1mg/ml标准蛋白溶液所测吸光度 R2=0.9983 y=2.2628x-0.00060 00.01 关于细菌内毒素的问题我公司产品是冻干粉,冻干前液体蛋白浓度10%(100mg/ml),内毒素20EU/ml.冻干后样品内毒素 20EU/mg.冻干前样品无菌实验是合格的,冻干机也验证合格的,冻干机密封实验也是没 称取25mg蛋白酶配成25ml溶液,取2ml测得含蛋白氮0,2mg,另取0.1ml 测酶活力,结果每小时可以水解酪蛋白产生1500μg酪氨酸,假定1个酶活力单位定义为每分钟产生1μg酪氨酸的酶量1) 酶溶液的蛋白浓度 羊抗兔IgG 这个应该是一个二抗吧 请问10mg/ml的浓度是不是要比5mg/ml的浓度低.5mg/ml的是不是更纯? 甲胎蛋白为8.9,标准值是0~8.1,单位是ng/mg,请问能说明什么?谢谢啦,很着急呀~单位是ng/ml 1mg/ml是1%的浓度嘛? 我想要配制0.2mg/mL的蛋白溶液10mL,是先配好2mg/mL的溶液再稀释比较准确,还是直接称取2mg蛋白定容于10mL容量瓶比较准确呢? 求摩尔消光系数辣根过氧化物酶浓度为0.05mg/mL,测得吸光度为0.03,我用的是10mL的玻璃比色杯,请问如何求其摩尔消光系数,因为后面我测酶活力的时候要用,如果知道酶活力的计算就更好了,我老 测辣根过氧化物酶酶活力测辣根过氧化物酶酶活需要先测摩尔消光系数,辣根过氧化物酶浓度为0.05mg/mL,测得吸光度为0.03,我用的是10mL的玻璃比色杯(边长3厘米),请问如何求其摩尔消光系数, SANDY的胶原蛋白的分子量是8000mg,请问一般的胶原蛋白含量是多少? 我在做金葡菌提取DNA实验,破细胞壁这一步很是失败,请问有没有不用溶葡萄球菌素的效果好的方法?我用溶菌我用的是0.5ml菌液,溶菌酶20mg/ml用200微升,37度水浴50分.蛋白酶k20微升. 关于配制MS培养基中激素浓度换算的问题现要配制1000mL的MS培养液,其中里面NAA激素的浓度是1mg/L,我现在有母液浓度是1mg/mL的NAA激素的母液,问需要加入母液多少?(我算的是1mL,别人算的是0.1mL).请 提取DNA时RNA酶的使用在纯化DNA时需要降解RNA,这时需要加入RNA酶的最终浓度一般是多大啊?比如我DNA溶液时300ul,我需要加入多少10mg/ml的RNA酶溶液,加过后怎么去除这些RNA酶蛋白质? 蛋白的分子量为140kd ,浓度为25ug/ml 请问每ml有多少分子? TCA/丙酮沉淀,蛋白为什么不溶呢?(我提取的是动物蛋白)