载体连接的时候PCR仪16度也可以啊?温度高点行不行啊?那后来的感受态细胞是TOP10,可以么?

载体连接的时候PCR仪16度也可以啊?温度高点行不行啊?那后来的感受态细胞是TOP10,可以么? 有的聚合酶在PCR产物的3,末端可以接上碱基A,易于与T载体连接,请问载体上的T碱基位于哪个末端?如果也位于3,端,似乎他们两个连不上啊 在做载体构建的时候,PCR时有目的条带,但是摇菌酶切没有东西,请问是怎么回事啊? 构建载体的时候,先用设计好的引物PCR所要的目的基因,再和T载体连接,再转化,再小抽,再双酶切,再和已经预先双酶切的目的载体连接,那么?先前的目的基因为什么不直接和目的载体相连呢?为什 为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急加点 kml?但是我转化后菌落长的还可以啊.酶切目的带在1000左右,质粒PCR在750左右了 我们机构想使用博凌科为的pSURE-T 载体连接试剂盒,据说可以简化PCR产物的克隆,用过的给我介绍下 菌落PCR的TM值和P基因的是不是一样啊连接的是T载体 菌落PCR 条带很暗 有杂带 也不亮 是不是要提高菌落PCR的TM值啊? pGEM-T载体的通用引物序列有哪些,pcr得到的片段长度是多少使用pGEM－T载体克隆了一段500bp的片段,想通过pcr后再酶切分型,筛选用于测序的样品.但在做pcr的时候不知道采用什么样的引物可以得 t载体连接产物4度可以保存3天吗 为什么构建克隆载体不需T4连接酶为什么PCR扩增出的DNA片段和克隆载体pMD 18-T连接不需T4连接酶,而和表达载体连接就需要T4连接酶. 双酶切鉴定（或者测序）是否含有目的基因的时候,为何用pMD18-T载体?过程主要是：从小麦胚胚芽鞘中提出总的RNA,反转录cDNA,然后纯化cDNA,特异性PCR扩增,电泳,得到目的基因,然后连接载体pMD18-T 构建酵母表达载体,目的基因来自植物体,可以含有启动子,内含子,构建酵母表达载体,目的基因来自植物体.请问可以用直接提取DNA,设计引物pcr扩增得到的基因片段来连接转化吗?目的基因里可 在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒用pET30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来 如果将PCR扩增的X基因片段与克隆载体连接,并转化入宿主大肠杆菌中,写出技术路线（包括基因和载体的连接、转化和鉴定）和关键点. PCR获得基因转入连接病毒载体到最后重组载体导入细胞全过程.菜鸟初习细胞方面的基因工程,想知道PCR目的基因连接病毒载体后,病毒为什么还要包装,包装的目的是什么?而包装后的病毒为什 PCR纯化产物与T载体连接后放置两天影响转化吗 目的片段连接表达载体后酶切出非特异带为什么我的载体11KB,连接了目的片段.PCR能扩出目的带,双酶切出现了三条带,一条载体,一条目的条带,一条非特异带3KB左右.载体上这两个酶只有一个酶 pcr产物不纯化直接酶切连接可以吗?PCR反应的buffer会不会对酶产生影响哦~