ISSR-PCR退火温度如何设定有些引物说明书上的Tm值只有30~40度,通过公式2(A+T)+4(G+C)-2计算的温度也只有30多度,我该如何设定退火温度?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/27 11:32:23
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ISSR-PCR退火温度如何设定
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ISSR-PCR引物的退火温度问题我做ISSR-PCR引物的退火温度能不能直接使用primer5.0这个软件计算得出的退火温度.理论上来说这是最佳的退火温度吗?
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求助巢式PCR退火温度的设定我最近准备做巢式PCR,下游引物用oligo dT,上游用两个基因特异性引物,但上游的两个引物和下游的oligo dT相比,Tm值差了将近10度,这样退火温度怎么设定呢?
如何优化pcr反应中的退火温度
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做ISSR 的PCR条件优化我想根据这几个做个正交试验 模板浓度,dNTP,引物浓度,taq酶,Mg离子浓度是不是太多了……?退火温度我用梯度PCR基本弄好了,总体积25μl,模板1μl,引物1μl,其它用的是mix跑的,
上下游引物退火温度分别为47、49℃,如何设置温度梯度PCR最合适引物退火温度低(上下游分别为47、49),P不出目的条带
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ISSR问题,万分感激!这个是成分分别加的,应该没有问题,之前做普通PCR都是这样的.今天我又换MIX,只加模板和引物,用五个退火温度还是一样,换了其他两种引物还是一片亮带,没有单一条带.这个
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