求助巢式PCR退火温度的设定我最近准备做巢式PCR,下游引物用oligo dT,上游用两个基因特异性引物,但上游的两个引物和下游的oligo dT相比,Tm值差了将近10度,这样退火温度怎么设定呢?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/10 16:59:51
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求助巢式PCR退火温度的设定我最近准备做巢式PCR,下游引物用oligo dT,上游用两个基因特异性引物,但上游的两个引物和下游的oligo dT相比,Tm值差了将近10度,这样退火温度怎么设定呢?
求助巢式PCR退火温度的设定
我最近准备做巢式PCR,下游引物用oligo dT,上游用两个基因特异性引物,但上游的两个引物和下游的oligo dT相比,Tm值差了将近10度,这样退火温度怎么设定呢?
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可尝试45-70度设个梯度退火,P一次就知道哪个温度最适合.如没有梯度退火的PCR仪,则可试试两个Tm值中间的温度,一般较多在50、55度可P出来.你试试吧.
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PCR的退火温度怎么设定
为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度?
ISSR-PCR引物的退火温度问题我做ISSR-PCR引物的退火温度能不能直接使用primer5.0这个软件计算得出的退火温度.理论上来说这是最佳的退火温度吗?
【跪求】我的PCR体系应该怎么设定?退火温度?我做一种真菌的pcr,引物序列左:aatcgacccgtttccgcctt, 右:gttagattgaccgcgattcc,生工合成单给的退火温度分别是59.85和57.8我的25微升体
关于退火温度与引物Tm~我用PP5做的引物发现引物Tm值比退火温度低 这很奇怪啊,做PCR是不是退火温度一定要比Tm高呢?
ISSR-PCR的退火温度怎么设计?
PCR的退火温度怎么选择
[求助] PCR产物条带很淡最近做的PCR一直条带很淡,已经调了一些条件,还是没有效果. 目前是这样的:目的片段大约2.5kb,退火温度55度,从电泳的结果看来目的条带很整齐,也没有非特异性扩增,
PCR反应的循环前和循环后的温度和时间做pcr除了必要的变性,退火,延伸的温度和时间,还需要在循环之前设定一个温度和时间,循环完成之后也要设定个温度和时间,最后还有个保存的时间,我想
ISSR-PCR退火温度如何设定有些引物说明书上的Tm值只有30~40度,通过公式2(A+T)+4(G+C)-2计算的温度也只有30多度,我该如何设定退火温度?
在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系?
铝合金的退火温度我从铝材市场买了一块厚0.5mm左右的铝板,想做板料的成形,可是现在的铝板塑性不是很好,想退火一下,怎么退火啊?设定多少温度?具体步骤是什么?这种退火的叫做什么退火,是
做pcr,如何确定最佳退火及延伸的时间和温度?
做荧光定量PCR和半定量PCR有什么区别?半定量的PCR退火温度和荧光定量PCR是一样的吗?
pcr退火温度怎么确定?
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PCR退火温度不稳定是什么原因?