请问设计动物的上游引物时,必须从ATG开始还是可以从ATG的上游开始?我的学植物的老师说应该从ATG开始,可是我的学动物的同学说可以从ATG的上游开始,因为他只是个载体的作用.我没学过生物.

请问设计动物的上游引物时,必须从ATG开始还是可以从ATG的上游开始?我的学植物的老师说应该从ATG开始,可是我的学动物的同学说可以从ATG的上游开始,因为他只是个载体的作用.我没学过生物. 基因的克隆,转导,表达,在对目的基因PCR时,为什么一些人设计的上游引物不是从ATG开始的,而是从中上段开始什么时候引物设计必须从目的基因的ATG开始,什么时候是可以从中间设计引物的 酶切位点与保护碱基加入如果有ATG怎么办?我克隆一个完整的CDS,有ATG,设计的引物上游直接以ATG开始,而下游直接以TTA开始（与TAA互补）,那么上游加入酶切位点与保护碱基时,如果有ATG怎么办? 引物设计中忘记加入在上游序列的酶切位点后面加ATG,对蛋白质相互作用研究有影响吗? PCR扩增基因设计引物时,用Primer5检测上游引物和下游引物的互补性,显示free energy= 1.50 Kcal/mol这样的引物可用吗? 请问您一个基因的全长已经克隆出来,怎样进行验证呢?从ATG和TGA设引物重新扩增,还是从非编区设引物呢我已经从ATG和TGA设引物了，挑了四五个单克隆，可是每个测序结果都有几个碱基突变， 请问用Codehop设计好的简并引物页面,哪是上游,哪是下游,以及怎样选择我要的一对引物啊, 质粒转录起始点插入两个碱基会移码突变么?从质粒中插入目的基因,设计引物的时候,目的基因的转录起始密码子ATG前插入了两个碱基,请问是否影响目的基因的正常表达?或者造成移码突变? 如果起始密码子ATG出现在引物的3′端可以吗?根据已知的N端氨基酸序列设计引物其中M只能译为ATG,还在最后 pp5引物设计用PRIMER自动搜索设计的多对引物中,能不能用一对引物的上游与另一对引物的下游配对 假设我有一个引物,上游引物Tm为65.2℃,下游为64.6℃.请问怎样设计退火温度梯度, 引物设计软件从哪搜索引物?很多引物设计软件里,选项是SEARCH,不明白从哪搜索的……还有blast验证引物是什么原理？是不是必须在NCBI里面有的序列才能验证？ 我想扩增一段目的基因,只知道一个CDS,ATG开始TAA结束的,后续要表达蛋白,怎么设计引物啊?只能贴着序列的两头设计吗?可是从两端开始设计的引物用软件一测试都不合格啊...TT 在PCR引物设计中,要求引物跨外显子,什么叫跨外显子呢?从一个外显子,到另一个外显子,也就是说引物的上游在这个外显子,下游就得在下一个外显子?是这个意思吗?跨外显子了就不在受DNA污染 引物设计的疑问我真的不懂,如果给出一段序列,如ggcttaaaagctagctacattcggtagcatca（开头为5'段）设计引物,上游引物到底是从这个基因序列的3'开始倒着写引物的序列还是从基因的5'段开始设计?为什 已知蛋白质N端序列,要想扩增其全基因,怎样设计引物?从5'端or3‘端如果N端序列为TNTPE请问下上游引物应为ACN AAY ACN CCN GAR 还是TGNTTRTGNGGNCTY? 设计引物时哪一些原则可以稍微忽略一些,引物长度必须是3的倍数吗? primer3引物设计结果怎么只有下游引物是原基因的互补序列,上游引物是原序列?直接在线设计的LEFT PRIMER tacacaaagacgctgccaagRIGHT PRIMER tggcttgttgttacccatga上游引物处原序列 tacacaaagacgctgccaag下游tcatgggtaac