PCR产物跑胶什么条带都没有是怎么回事DNA OD值为1.88,浓度3.4ug/uL ;跑胶检测条带清楚

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/17 05:41:16
PCR产物跑胶什么条带都没有是怎么回事DNA OD值为1.88,浓度3.4ug/uL ;跑胶检测条带清楚
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PCR产物跑胶什么条带都没有是怎么回事DNA OD值为1.88,浓度3.4ug/uL ;跑胶检测条带清楚
PCR产物跑胶什么条带都没有是怎么回事
DNA OD值为1.88,浓度3.4ug/uL ;跑胶检测条带清楚

PCR产物跑胶什么条带都没有是怎么回事DNA OD值为1.88,浓度3.4ug/uL ;跑胶检测条带清楚
做PCR时,最抑闷的一件事就是花了三个多小时,一点儿结果都没有.以前做的时候,我也遇到这增的问题!所有的反应液和底物加好了,机器设好了,跑吧,跑完PCR了,好的,再来跑电泳检测,结果,白花花一大片,什么都没有,那一刻,觉得自己好失败,别人的什么有,自己的什么都见不到,真想把机器给砸了.
    后来不断的调整Taq酶的浓度,当然是增加了,有了一点儿效果,但是,还是不理想,再调整(降低)底物(DNA)的浓度,还是不行,再调整(稀释到50倍),再做一次,有了,很是漂亮而又清晰的PCR产物的条带! 那一刻,真是太高兴了!紧接着,又做了一次,所有的样品都有PCR产物了.
    总结一下,就是DNA的问题,它的浓度太高,而且在提取DNA时如果不纯,那么里的杂质就会太多,只有通过稀释DNA(同时也是稀释杂质),才能使DNA在样品里的浓度和杂质浓度的比值无限大,在这样的条件下,只要有足够的酶,那么,反应就能正常进行,得到预期的产物.因为,如果杂交的浓度过大,酶的活性就会受到抑制.
    因此,我的建议是:第一,稀释底物浓度,分两个梯度(25倍,50倍);
                      第二,加大酶的浓度(1.5或2U).
                      以上是在25uL反应体系下的建议

PCR失败呗!PCR失败的原因有很多可能了,自己找吧。

PCR失败了,可能是引物,PCR程序的问题.

会不会是没有扩增成功,OD显示的是单核苷酸的浓度

可能回收时DNA提取不好。建议DNA提取完了以后再去跑胶检测的,测定DNA提取的效果和浓度。然后做PCR。

模板或者引物的问题拉

PCR产物跑胶什么条带都没有是怎么回事DNA OD值为1.88,浓度3.4ug/uL ;跑胶检测条带清楚 PCR产物电泳鉴定时Marker条带竟然没有.我前两天跑电泳的时候,PCR产物倒是能看到条带,就是marker条带没有了,不晓得是怎么回事?以前跑电泳时,Marker条带都很清晰的. PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP:我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激. 您好.我最近的PCR扩的产物成弥散状,但是能看见目的条带,这是怎么回事啊,我之前试条件时都没有弥散这样的产物酶切能切吗? 【求助】菌落PCR有目的条带与菌液PCR却什么都没有? 【求助】菌落PCR有目的条带与菌液PCR却什么都没有? 【求助/交流】PCR扩增后没有条带是怎么回事? 【求助/交流】PCR扩增后没有条带是怎么回事? PCR产物条带浅怎么办 PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么? PCR产物跑胶,如果条带很粗,看条带大应该小看上沿还是下沿? PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. PCR产物跑胶,条带亮度与DNA浓度还是总量有关? 请问RT-PCR:RNA跑胶没有明显条带,能否做成目标片段RNA的PCR? pcr产物(P出来很亮)用回收试剂盒纯化后,没有条带了如题,我用上海生工的胶回收试剂盒SK11-201.不晓得是怎么回事,希望有知道的朋友给指点下, 琼脂糖凝胶电泳用母液没有条带,而PCR扩增产物有条带,难道是母液的DNA浓度太低,电泳跑不出来? 为什么我的PCR产物有一半能跑出来啊还有一半什么都没有?做了2次都这样.我跑了十个样本,结果只有五个有条带(跟我需要的一样),另外五个什么都没有。我没说一定都能扩出来了,我只 pcr产物跑琼脂糖胶都是整条泳道亮,求如果改变pcr的条件可以pcr出单一条带