作业帮细胞培养中的支原体污染用什么方法最好呢?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/15 21:28:02
细胞培养中的支原体污染用什么方法最好呢?
细胞培养中的支原体污染用什么方法最好呢?
细胞培养中的支原体污染用什么方法最好呢?
组织细胞培养工作中,可以从以下几方面来预防支原体的污染：控制环境污染；严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基冲加入适量的抗生素.
抗生素主要用于消毒培养液,是培养过程中预防微生物污染的重要手段,也是微生物污染不严重时的“急救”方法.不同抗生素杀灭微生物不同,应根据需要选择.
在细胞培养过程中如果发现破碎的细胞甚多,培养细胞需要频繁改善营养环境才能支持长期传代培养时,应该怀疑支原体污染.支原体污染难以观察特殊的外观变化,培养液也不浑浊.
支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有：抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理.要注意的是：支原体没有细胞壁,故作用于细胞壁生物合成的抗生素,如内酰胺类、万古霉素等是不敏感的；对多粘菌素、利福平、磺胺药物普遍耐火药.对支原体最有抑制活性抗生素是四环素类、大环内酯类等,氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小的抑制作用.必要时更换所有培养用物.通常,滤过除菌的方法对支原体是没有作用的.
由于一些微生物,如支原体,病毒等能通过滤膜,所以过滤药品仍潜在被外源微生物污染的危险,近年来,60Co辐射灭菌技术在医药、食品等领域广泛应用,由于辐射灭菌能够彻底杀灭所有微生物.有试验证实以2Mrad辐射处理的各培养基样品达到了无菌要求,经多批培养试验,辐射灭菌安全可靠；辐射灭菌的培养基营养性能不低于过滤组,证明辐射灭菌对培养基性能无不良影响；对血清的辐射灭菌试验效果也表明60COγ射线不影响培养效果.把干粉培养基经无菌操做定量分装于灭菌容器内,辐射后以干粉原型贮藏,不但培养基的纯净性得到保障,而且营养性能较过滤后以水溶液形式保存更稳定,对谷氨酰胺等这类水溶液不稳定者特别合适.
目前,有专门做支原体检测的试剂盒,可以用细胞滴片检测.市场上已有了新一代支原体抗生素M-Plasmocin（InvivoGen公司）,能有效的杀灭支原体,又不影响细胞本身的代谢,而且处理过的细胞不会重新感染支原体.另外,配合支原体检测试剂盒（市场上有售,如美国ICN公司的产品）,可以帮助尽快发现支原体的污染.