如何用pcr测未知基因的序列以前没有学过分子生物学 希望能用通俗的话解释 还有想问下1 pcr有什么应用2从提取rna 到cDNA 在进行pcr 之后还能进行什么 3我所测得基因序列是未知的,是不是在设
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/27 22:21:19
如何用pcr测未知基因的序列以前没有学过分子生物学 希望能用通俗的话解释 还有想问下1 pcr有什么应用2从提取rna 到cDNA 在进行pcr 之后还能进行什么 3我所测得基因序列是未知的,是不是在设
如何用pcr测未知基因的序列
以前没有学过分子生物学 希望能用通俗的话解释 还有想问下1 pcr有什么应用
2从提取rna 到cDNA 在进行pcr 之后还能进行什么 3我所测得基因序列是未知的,是不是在设计引物时只能找亲缘相近的 那我pcr之后得到的基因序列 又不能确定是不是我想要的 这又该怎么办呢? 谢谢了
如何用pcr测未知基因的序列以前没有学过分子生物学 希望能用通俗的话解释 还有想问下1 pcr有什么应用2从提取rna 到cDNA 在进行pcr 之后还能进行什么 3我所测得基因序列是未知的,是不是在设
PCR是用来扩增目的片段的,可以富集你想要的片段然后用来测序或者克隆基因,可以在这个片段上做点突变,甚至可以用来测定目的片段在原始模版当中的丰度(包括有无).
cDNA除了进行PCR,也可以用来做cDNA文库
第三个问题完全听不懂,不知道你的基因未知到什么程度,如果你完全不知道他的序列,你怎么确定他是一个什么基因,跟什么比较接近,又怎么设计引物呢,不清楚你要的是个什么标准.测序的话都是用TA克隆将PCR产物克隆到质粒上,拿单克隆去测的.这样测序不需要特异性引物.
PCR是一种体外快速扩增DNA的方法,用于放大特定的DNA片段,数小时内可使目的基因片段扩增到数百万个拷贝的分子生物学技术。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DN...
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PCR是一种体外快速扩增DNA的方法,用于放大特定的DNA片段,数小时内可使目的基因片段扩增到数百万个拷贝的分子生物学技术。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基互补配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,重复循环变性--退火--延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
cDNA除了进行PCR,也可以用来做cDNA文库.
第三个问题一般不会出现.
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