任何PCR引物都需要加保护碱基嘛?

任何PCR引物都需要加保护碱基嘛? PCR 引物怎么加保护碱基,一定要按特意序列吗? PCR时引物的概念包括加进去的酶切位点和保护碱基嘛?算进引物的长度吗?一块分析嘛?我设计的下游引物只有15个碱基,但primer5上的长度18个,如果我删去三个就不配对了（只是下游引物）,影响 引物加了保护碱基和酶切位点（共14个碱基）后退火温度需要调整吗? 引物不含保护碱基,PCR扩增结果有什么影响 做克隆时,请问在引物前加的一段保护碱基和内切酶序列需要和cDNA互补吗? 利用PCR技术进行DNA扩增时需要加入一对碱基互补的引物 为什么错? 设计引物的时候,酶切位点的前面的保护碱基应该怎么加,遵循什么原则. 简并引物经PCR的产物是不是都需要经过克隆?我设计的是一对简并引物,测序后有4个位点出现重叠峰,是不是简并引物的PCR产物都会出现此现象?克隆后就能确定这4个重叠峰的碱基吗?我现在已经 PCR引物设计中,引物上是否需要每个碱基都与模板链结合?为了得到想要的Tm值,或是保证长度,不产生二聚体等,可不可以有在引物上添加一些不配对的碱基?如下图：可以的话,会对扩增有影响么? 为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀?还有,好多的Tm值都代表什么呢?引物Tm60多,二级结构的Tm达到40度有关系吗?G值有什么用 利用PCR技术复制那么多DNA一共需要多少引物?每复制一次都需要一段引物吗? PCR引物设计问题我是要扩增一个片段,加上双酶切位点,片段就那么大,我就需要那么大加酶切位点?这引物怎么设计?是不是只要5‘端序列,以及3’端的反向互补序列加上酶切位点和保护碱基就 PCR时 引物的5‘端 有时需要加酶切位点 请问是怎么加上去的 PCR引物设计不好,如何提高引物特异性?设计的PCR引物都是80多分的样子,但是一旦加上酶切位点和保护碱基以后,引物的特异性就变得特别差,如何解决这种问题,有没有什么设计引物的技巧呢? pcr技术中的引物需要复制吗? PCR扩增时为什么需要引物呢? 引物设计怎么加保护性碱基