PCR扩增出来几条带,怎么改进我扩增的是霉菌18rDNA,大小是1600，PCR体系是50的，条件是94,3min;94,1min;55,1min,72,1min,72,10min.30个循环，按道理来说，电泳后应该只有一条带，但我的有四条带，有三条

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/24 13:42:04
PCR扩增出来几条带,怎么改进我扩增的是霉菌18rDNA,大小是1600，PCR体系是50的，条件是94,3min;94,1min;55,1min,72,1min,72,10min.30个循环，按道理来说，电泳后应该只有一条带，但我的有四条带，有三条
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PCR扩增出来几条带,怎么改进我扩增的是霉菌18rDNA,大小是1600，PCR体系是50的，条件是94,3min;94,1min;55,1min,72,1min,72,10min.30个循环，按道理来说，电泳后应该只有一条带，但我的有四条带，有三条
PCR扩增出来几条带,怎么改进
我扩增的是霉菌18rDNA,大小是1600，PCR体系是50的，条件是94,3min;94,1min;55,1min,72,1min,72,10min.30个循环，按道理来说，电泳后应该只有一条带，但我的有四条带，有三条在1000--2000之间，且靠的很近，另一条比2000大，这是怎么回事啊？要怎样改进啊？

PCR扩增出来几条带,怎么改进我扩增的是霉菌18rDNA,大小是1600，PCR体系是50的，条件是94,3min;94,1min;55,1min,72,1min,72,10min.30个循环，按道理来说，电泳后应该只有一条带，但我的有四条带，有三条
两方面考虑：
1 改善PCR反应条件,从你提供的情况看,55度退火太低.建议做个温度梯度PCR,在55度到67度间,每升高2度,做一个反应.另建议将反应体系设为20微升（温度升降过程易于达到目标值）.
2. 如果通过改变退火温度,仍然达不到想要效果,考虑模板是否合适；此外,建议对引物重新设计,适当增长引物长度,改变引物位置.
考虑到了上述因素,一般来说,没道理做不出一条带的.

你的72度延伸时间太短啦，PCR的延伸速度是一分钟1kb，你的目的片段是1600，至少延伸时间要达到1分钟40十多秒啊，一分钟是肯定不可能完成你想要的1600bp的目的片段的！你那些大小不等的片段有可能是扩增到半截的片段。还有55度退火不用那么长时间，一般30、40秒足以。...

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你的72度延伸时间太短啦，PCR的延伸速度是一分钟1kb，你的目的片段是1600，至少延伸时间要达到1分钟40十多秒啊，一分钟是肯定不可能完成你想要的1600bp的目的片段的！你那些大小不等的片段有可能是扩增到半截的片段。还有55度退火不用那么长时间，一般30、40秒足以。

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PCR扩增出来几条带,怎么改进我扩增的是霉菌18rDNA,大小是1600，PCR体系是50的，条件是94,3min;94,1min;55,1min,72,1min,72,10min.30个循环，按道理来说，电泳后应该只有一条带，但我的有四条带，有三条 PCR扩增不出来条带的原因? PCR的扩增产物是什么 是如何扩增出来的 大家帮我看看这个胶图,是ssr的pcr扩增,用聚丙烯酰胺凝胶电泳,条带不清晰,哪里需要改进呢? 我做的是分子鉴定真菌,用的是通用引物ITS1和ITS4,pcr扩增后只有marker有条带,其他的都没有是什么原因.另外一个真菌能扩增出来条带 组织提取的cDNA和细胞提取的cDNA用同一引物PCR扩增出来的条带长度不一样,是什么原因?有什么方法改进吗 细菌基因组DNA 的PCR扩增问题我提取了革兰氏阴性菌的基因组DNA并用几种不同的引物对其进行PCR扩增,意在扩增一段特定的基因片段,其中一对引物扩增出了两条带,一条500bp左右,为目的条带,另 琼脂糖凝胶电泳用母液没有条带,而PCR扩增产物有条带,难道是母液的DNA浓度太低,电泳跑不出来? PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么? 菌液PCR不同条带将已扩增出来的993bp的cDNA与T载体连接,之后DH5α转化,涂平板,挑克隆!菌液PCR为何一组检测到750bp有条带,一组1000bp处有条带两种结果!1000bp条带处是我预期的条带!麻烦大师留下相 基因的PCR扩增实验扩增不出DNA条带是什么原因? 如何消除PCR的拖尾PCR扩增出来有目的条带,但是有拖尾,呈弥散片 关于PCR的问题：PCR如果目的基因扩增出来了是不是条带中的引物二聚体就没有了呀? 不同基因组用同一引物扩增,条带一样的原因不同基因组用同一引物PCR扩增,其条带是一样的? 特异引物PCR问题各位大牛,小弟初涉分子生物实验,最近在用设计好的特异性引物扩增保守序列,可是总也是扩增不出来,常常是只有引物二聚体,没有任何扩增条带,我也试着在引物报告单上所给 小片段DNA（100-200bp）的PCR扩增PCR模板是100bp-200bp的片段,用SSR引物扩增的时候,出现的不是单一的目的带,目的带出现的同时还有许多非特异性扩增条带,有时候就是条带扩不出来,对于小片段模板 如何提高引物扩增的特异性现在合成了几对引物,要把一个基因扩出来,怎么提高特异性?升高PCR的温度了,做了8个温度梯度,跑电泳,最高温没有条带,最低温很多条带,中间的其次,请问是不该降低 为什么我们做PCR扩增后条带出不来?我们做PCR的正交体系,其中有几个样怎么也没有东西出来,其他的部分即使有条带出来 效果也特别不好