细菌分子鉴定的方法有哪些?具体步骤和指标是什么?把16SrRNA、RAPD、质粒质谱分析法、核酸杂交、脉冲场凝胶电泳分析法等说一下.满意回复追加150点财富
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/07 12:31:59
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细菌分子鉴定的方法有哪些?
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一般从DNA、RNA和蛋白质这三个方面鉴定.将三种物质分别提取出来,各自进行鉴定.鉴定的方法可以用你提到的这些.
1.核酸杂交:简单的说,就是将需检测的核酸与标记的分子结合使得未知核酸可以被检测到.
2.脉冲场凝胶电泳:利用电场让不同大小的带电DNA分子以不同的速度移动,从而将不同大小的分子分开.可分离10kb--10mb的DNA分子.
3.16S rRNA :16S rRNA所对应的 16S rDNA基因在微生物基因组中具有高度保守性;对16S rDNA而言,如果出现3个碱基以上的差异就可以断定细菌不属于同一种属.它具有高度的灵敏性,而且不需要培养,检测指标也很单一.可以快速检测未知微生物或致病微生物.
4.RAPD:对整个未知序列的基因组进行多态性分析的分子技术.先进行PCR扩增,然后电泳分离染色,在紫外透视仪上检测多态性.
5.质粒质谱分析法:我只了解过蛋白质的质谱分析技术,质粒的没有了解过.
蛋白质:将蛋白质酶解成小肽段并混合基质,用激光将呈离子化气体状态的待测物喷射,经电场到达检测器,根据到达的时间分析肽段的分子质量.