求救!pcr产物没有条带...前8个孔是我两个样品4个梯度的pcr产物,marker,质粒(阳性对照),空白对照觉得这次的marker还有质粒都有拖尾的现象,质粒可能是浓度太大了,没有稀释,可是marker也这样,这次

来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/27 09:38:51
求救!pcr产物没有条带...前8个孔是我两个样品4个梯度的pcr产物,marker,质粒(阳性对照),空白对照觉得这次的marker还有质粒都有拖尾的现象,质粒可能是浓度太大了,没有稀释,可是marker也这样,这次
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求救!pcr产物没有条带...前8个孔是我两个样品4个梯度的pcr产物,marker,质粒(阳性对照),空白对照觉得这次的marker还有质粒都有拖尾的现象,质粒可能是浓度太大了,没有稀释,可是marker也这样,这次
求救!pcr产物没有条带...
前8个孔是我两个样品4个梯度的pcr产物,marker,质粒(阳性对照),空白对照
觉得这次的marker还有质粒都有拖尾的现象,质粒可能是浓度太大了,没有稀释,可是marker也这样,这次制胶很小心了,缓冲液也是新的.
问题最大是pcr产物竟然一个都没有出来,我把模板也跑了一次,是有条带的,没有完全降解掉.虽然模板没有很纯,但是以前也是可以P出来了,还有,如果PCR真没P出来,为什么没有出现引物二聚体啊?求救!
目的片段为750左右,跟质粒一样

求救!pcr产物没有条带...前8个孔是我两个样品4个梯度的pcr产物,marker,质粒(阳性对照),空白对照觉得这次的marker还有质粒都有拖尾的现象,质粒可能是浓度太大了,没有稀释,可是marker也这样,这次
首先要确定引物是否降解了,pcr常用的引物都是10p浓度的,如果四度放久了会降解,既然以前能做出来,那么很可能是引物降解了,而且你的阳性对照是有条带的说明PCR的体系和条件是没问题的,所以推测引物出问题了,重新稀释一些引物再试试吧,PCR条件也可以变变,做个touchdown试试,

我的知识范围还远不及此....

p不出来跟你做胶、拖尾不拖尾有鸟的关系？p不出来就一定有引物二聚体？扯淡
首先你保证自己的操作是没有问题的，看看你自己以往操作的结果好不好就能知道，如果同样的条件下你一直都是有时候能P出来有时候不行，那就是你的技术问题。
其次检查PCR试剂，是不是有的试剂时间长或者污染了，变质了，失效了。特别是Taq和dNTP这两样，最容易出问题。
PCR仪器也检查下，程序是否正常，样品台...

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p不出来跟你做胶、拖尾不拖尾有鸟的关系？p不出来就一定有引物二聚体？扯淡
首先你保证自己的操作是没有问题的，看看你自己以往操作的结果好不好就能知道，如果同样的条件下你一直都是有时候能P出来有时候不行，那就是你的技术问题。
其次检查PCR试剂，是不是有的试剂时间长或者污染了，变质了，失效了。特别是Taq和dNTP这两样，最容易出问题。
PCR仪器也检查下，程序是否正常，样品台的温度控制是否准确，是否存在温度梯度。
另外，做实验不要那么死板，胶的浓度随便做，你不就跑个胶看条带么？又不是跑胶分离。还加marker，虽然marker不贵，但是你这里加marker有什么用？你都有了阳性对照了，本身就是一个分子量的标记了，你还加marker不是画蛇添足？

收起

你的目的片段多大啊，拖带会不会是电压太高的原因

求救!pcr产物没有条带...前8个孔是我两个样品4个梯度的pcr产物,marker,质粒(阳性对照),空白对照觉得这次的marker还有质粒都有拖尾的现象,质粒可能是浓度太大了,没有稀释,可是marker也这样,这次 PCR产物电泳鉴定时Marker条带竟然没有.我前两天跑电泳的时候,PCR产物倒是能看到条带,就是marker条带没有了,不晓得是怎么回事?以前跑电泳时,Marker条带都很清晰的. PCR产物条带浅怎么办 PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. 电泳同时点了总DNA和PCR之后的产物以作对比,但总DNA没有条带,PCR产物的电泳条带很亮很清楚,为什么 PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 PCR产物的酶切问题我用的PCR-RFLP法分析SNP：我的PCR产物有条带,可是我做酶切之后还是那条PCR产物的条带做了好几板都这样.病例和对照全做了,最后都没有切开的条带,这是怎么回事?十分感激. PCR产物跑胶什么条带都没有是怎么回事DNA OD值为1.88，浓度3.4ug/uL ；跑胶检测条带清楚 琼脂糖凝胶电泳用母液没有条带,而PCR扩增产物有条带,难道是母液的DNA浓度太低,电泳跑不出来? PCR扩增产物电泳后显示的条带说明什么? ISSR标记,PCR产物电泳条带不清晰,怎么办 PCR条件优化请问高手PCR产物目的条带以下有杂带,PCR条件该如何优化? pcr产物电泳后为何条带过宽,而且有的条带清晰,有的则不清晰 pcr产物与Loading buffer没有混匀,后果是什么?会不会导致电泳时拖尾?我pcr产物跑胶后除目的条带以外出现拖尾,原因可能是与loading buffer 没有混匀吗? 二次PCR产物,电泳条带与第一次PCR一样不明显,如何解决 pcr产物电泳一般需几微升点样?2微升的时候没有条带是否说明就没p出来呢? 嵌套式 PCR第二步反应无产物?嵌套式PCR怎么稀释第二部的产物?我试过2倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、100倍,都没有条带.第一次pcr有条带,不过较淡.是用无菌水稀释没错吧?然后做为第二部的 普通PCR 为什么只有引物二聚体没有目的条带?