作业帮荧光PCR反应中,低浓度的扩增曲线会歪是什么原因?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/12/01 14:00:32
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荧光PCR反应中,低浓度的扩增曲线会歪是什么原因?
荧光PCR反应中,低浓度的扩增曲线会歪是什么原因?
荧光PCR反应中,低浓度的扩增曲线会歪是什么原因?
你说的标准品的浓度是和你的标本比较那个更低呢?如果标准品和标本在大概相同的CT值时只是标本曲线往下爬的话,我猜测是你的标本模板不干净,有抑制物进去了,因为曲线往下趴明显就是扩增效率的问题,扩增效率不高,有引物设计问题也有酶反应问题,既然你说标准品不会,那就说明引物设计没问题.
如果标准品的CT要比标本小很多,标本在低浓度下趴也很正常,当引物模板浓度低,如果PCR体系设计不是很牛逼的话低浓度时下趴是正常的.
判断扩增曲线是否良好的指标主要有几个方面：
l 曲线拐点清楚，特别是低浓度样本指数期明显，扩增曲线整体平行性好，基线平而无上扬现象，低浓度样本扩增曲线指数期明显。
l 曲线指数期斜率与扩增效率成正比，斜率越大扩增效率越高。
l 标准的基线平直或略微下降，无明显的上扬趋势。
各管的扩增曲线平行性好，表明各反应管的扩增...
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判断扩增曲线是否良好的指标主要有几个方面：
l 曲线拐点清楚，特别是低浓度样本指数期明显，扩增曲线整体平行性好，基线平而无上扬现象，低浓度样本扩增曲线指数期明显。
l 曲线指数期斜率与扩增效率成正比，斜率越大扩增效率越高。
l 标准的基线平直或略微下降，无明显的上扬趋势。
各管的扩增曲线平行性好，表明各反应管的扩增效率相近。
我认为是各反应管扩增效率差异有点大吧
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你指的歪是什么意思？
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